產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR抑制劑(BIBX 1382)
英文名稱:BIBX 1382
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
BIBX1382是EGFR抑制劑,IC50為3nM,對ErbB2的IC50為3.4μM,而對別的相關(guān)酪氨酸激酶的IC50均>10μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:196612-93-8 別名:Falnidamol 純度:96.92% 分子量:387.84 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
耐冷冷桿菌人主要組織相容性復合體Ⅱ類Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離睪(F-TESTO)
大毛霉人載脂蛋白A1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠睪(T)
大腸埃希菌人載脂蛋白B100Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠睪(T)
尖角凸臍蠕孢人白血病抑制因子受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠孕激/孕(PROG)
金黃桿菌屬人免疫球蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠孕激/孕(PROG)
蘋果黑腐皮殼菌人免疫球蛋白GBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
新疆鹽地桿菌人免疫球蛋白MBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
麻疹孿生球菌人纖溶原激活物抑制因子1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠降鈣(CT)
光帽鱗傘人纖溶原激活物抑制因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠降鈣(CT)
韓國游動微菌人血纖蛋白原降解產(chǎn)物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)
大腸埃希氏菌人血栓調(diào)節(jié)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)
枯草芽孢桿菌人血小板衍生生長因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠內(nèi)皮1(ET-1)
釀酒酵母人血小板活化因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠內(nèi)皮1(ET-1)
壁檸檬球菌人組織型纖溶原激活劑Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠雌二(E2)
梭孢環(huán)柄菇人組織因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠雌二(E2)
海濱海芽孢桿菌人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠皮質(zhì)(Cortisol)
鋅指蛋白ZBTB39抗體紅菇蠟傘黃胸鼠肺成纖維細胞
鋅指蛋白231抗體炭疽芽孢桿菌黑化大家鼠肺成纖維細胞
鋅指脂蛋白217抗體仙臺鏈霉菌大蹄蝠皮膚細胞
鋅指蛋白925抗體羊毛狀青霉大長舌果蝠肺細胞
EGFR抑制劑(BIBX 1382)釀酒酵母 異南五味子丁
硬毛栓孔 乙酰哈巴苷
雙環(huán)林地蘑菇 硝酸咪康唑
白酒紅鏈霉 短葶山麥冬皂苷C
黃硬皮馬勃 阿奇霉
易脆毛霉 鹽酸水蘇堿
慢生類諾氏 乙酰水楊酸
尖孢鐮孢 洋艾
曲霉 鹽酸壯觀霉
托姆青霉 竹節(jié)參皂苷ⅣA
枯草芽孢桿 鹽酸萬古霉
產(chǎn)黃青霉 絡石苷
洋蔥伯克霍爾德氏 鏈霉硫酸鹽
節(jié)桿屬 羥基茜草
嗜中溫寒冷桿 多粘E硫酸鹽
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)