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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CAY10505 | 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
CAY10505是強的，有選擇性的PI3Kγ抑制劑，IC50值是30nM. 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1218777-13-9 純度：98.87% 分子量：289.28 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
Aquamicrobium aerolatumCandida glabrata
平菇(雙耐黑平)Zygosaccharomyces rouxii
泡盛曲霉Pichia membranifaciens
聚貪噬菌Saccharomyces bulderi
德氏乳桿菌保加亞亞種Saccharomyces exiguus
少根根霉Rhodotorula mucilaginosa
pcDNA3.1/Hygro(+)Pichia fermentans
葡萄球菌屬Rhodotorula mucilaginosa
松口蘑Pichia fermentans
Acinetobacter schindleri Candida ethanolica
禾谷Candida pseudolambica
釀酒酵母Cryptococcus laurentii
蠟狀芽孢桿菌Cryptococcus flavus
天門冬擬莖點霉Cryptococcus laurentii
枯草芽孢桿菌Cryptococcus laurentii
釀酒酵母Cryptococcus flavus
小鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒肝結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) 沒食子
小鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒核突觸蛋白抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) 沒食子
小鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內參抗體）人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab) 沒食子酯
小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab) 沒食子甲酯
PI3Kγ抑制劑(CAY10505)SMC4 英文名稱： 染色體結構維持蛋白4抗體 0.2ml
eIF4EBP1 英文名稱： eIF4E結合蛋白抗體 0.1ml
可溶性載質轉運蛋白SLC24A5抗體 Anti-SLC24A5 0.1ml
Anti-TERT/FITC 熒光素標記端粒酶逆轉錄酶抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MBP(Tyr203) 磷酸化髓鞘堿性蛋白抗體 規格 0.1ml
ARIP2B(Activin receptor 2B) 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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