人肝動脈平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人肝動脈平滑肌細胞分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發展及穩定性有關。

方法簡介：

公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

MN-h, 小鼠海馬神經元  HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液   小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2  CoLo 320DM細胞，結腸癌細胞 人卵巢癌細胞系,3AO細胞 兔原代腎小球系膜細胞 小鼠原代牙齦上皮細胞

ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽)

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein

FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)

CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽) Protein

大鼠內皮素受體A(EA)試劑盒 ，英文名： EA ELISA Kit

Mouse platelet factor 3 (PF-3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒

RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGIP(MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide)ELISAKit小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽

細胞脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量試劑盒20次

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒規格：96T/48T

小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒   96T/48T

人肝動脈平滑肌原代細胞豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)試劑盒

Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCreatineKinase,CK試劑盒人肌酸激酶(CK)試劑盒規格：96T/48T

組織DNA損傷彗星熒光試劑盒20次

Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒規格：96T/48T

EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein

APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)

MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標簽) Protein

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽)

CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白