人宮頸癌成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人宮頸癌組織源成纖維細胞分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織；宮頸癌也稱子宮頸癌，指發生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤，是女性常見惡性腫瘤之一，發病率位于女性腫瘤的第二位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延，向下至陰道穹窿及陰道壁，向上可侵犯子宮體，向兩側可侵犯盆腔組織，向前可侵犯膀胱，向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉移至宮頸旁、髂內、髂外、腹股溝淋巴結，晚期甚至可轉移到鎖骨上及全身其他淋巴結。血行轉移比較少見，常見的轉移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環境即腫瘤細胞生存的外部環境，由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質（Extracellular matrix，ECM）構成，包括纖維細胞，免疫細胞，內皮細胞，間充質干細胞等，腫瘤細胞通過調控這些間質細胞，創造出有利于自身侵襲轉移的條件，從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據表明，腫瘤微環境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環境中，研究多也是主要的間質細胞是腫瘤相關成纖維細胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

MOLT-4 人急性淋巴母細胞白血病細胞  CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細胞裂解液   LYZL2 Others Human 人 Lysozyme 2 / LYZL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   GBP1 Others Human 兔原代腎上腺髓質細胞 豬原代乳腺上皮細胞

AGEs control article(advanced glycosylation end products control article 50mgAGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產物蛋白對照品

DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白

IL17RA重組小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 蛋白 Protein

TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (Fc 標簽)

NT5C3A重組人 NT5C3 蛋白 Protein

大鼠內凝集蛋白1(ITLN1)試劑盒 ，英文名： ITLN1 ELISA Kit

Monkey soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 猴可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGHRP-Ghrelin(Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin)ELISAKit小鼠生長激素釋放肽ghrelin

細胞含量比色法定量試劑盒20次

RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)試劑盒規格：96T/48T

小鼠肌酸激酶(mouse CK)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠羥甲基賴酸(mouse CML)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠C-肽(mouse C-peptide)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

人宮頸癌成纖維原代細胞小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)試劑盒

Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPT試劑盒人轉氨酶/谷轉氨酶(ALT/GPT)試劑盒規格：96T/48T

植物O-糖基糖蛋白化試劑盒5次

Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒規格：96T/48T

CD40LG重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白  Protein

成纖維細胞生長因子23(FGF23)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23)

PTPN12重組人 PTPN12 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽), Biotinylated

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白