人冠狀動脈平滑肌原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代冠狀動脈平滑肌細胞 人急性T淋巴細胞白血病細胞 英文名稱： JM B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞 1ml/T75 786-O [786-0], 人透明腺癌細胞 HMF 人肌肉組織來源細胞 小鼠原代三叉神經(jīng)元細胞

人冠狀動脈平滑肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

人冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化，調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人冠狀動脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人冠狀動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

Mv1Lu細胞，貂肺上皮細胞 人紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4  BRL-3A(大鼠正常肝細胞)     NSC，大鼠神經(jīng)干細胞 人腦視神經(jīng)膠質瘤細胞，Hs 683細胞 RF/6A(猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內皮)細胞) 兔原代神經(jīng)膠質細胞 人原代牙髓成纖維細胞

Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原

EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標簽)

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標簽)

METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein

大鼠免疫球蛋白樣EGF樣域酪酸激酶1(Tie1)試劑盒 ，英文名： Tie1 ELISA Kit

Mouse insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒

RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 大鼠(Cyt-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGFAP(Humanglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白

細胞甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶連續(xù)反應比色法定量試劑盒20次

RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠阿立新A(OrexinA)試劑盒   96T/48T

小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒   96T/48T

小鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒   96T/48T

小鼠γ基(GABA)試劑盒   96T/48T

人冠狀動脈平滑肌原代細胞小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒

Human aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 人Ⅱ(FⅡ)試劑盒 進口分裝

HumanApelin36,AP12試劑盒人Apelin36(AP36)試劑盒

植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次

Humaotalbileacide,TBAELISAKit人總膽汁酸(TBA)試劑盒

PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)

KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein

CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白

CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)