人腦靜脈血管平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人腦靜脈血管平滑肌細胞分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈；小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢，進入靜脈導血管再到頭皮，后流入椎管中的椎旁靜脈系統。腦靜脈系統有大量交通枝靜脈叢，即使兩側頸內靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人腦靜脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人腦靜脈血管平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

NCI-N87(人胃癌細胞)   小鼠真皮成纖維細胞   牛腎細胞;MDBK  CV-1細胞，非洲綠猴腎細胞 HPAC(人胰腺癌細胞) CM-H010人小氣道上皮細胞CM-H027人淋巴成纖維細胞人結直腸腺癌細胞 兔原代臍靜脈內皮細胞 小鼠原代骨髓單核細胞

BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A 0.5mgBMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原

F13B Protein Human 重組人 Coagulation Factor XIII B chain / F13B 蛋白

SERPINB8重組小鼠 SerpinB8 蛋白 Protein

CD276 Protein Rat 重組大鼠 B7-H3 / CD276 蛋白

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein

大鼠粒細胞趨化蛋白2(GCP2)試劑盒 ，英文名： GCP2 ELISA Kit

Monkey leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit白三烯C4(LTC4)試劑盒

RatCyclosporineA,CsAELISAKit 大鼠A(CsA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGALELISAKit大鼠甘肽/甘素

細胞胱(cystine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

ratProstaglandinF,PG-FELISAKit大鼠前列腺素F(PGF)試劑盒規格：96T/48T

小鼠轉酶試劑盒   小鼠轉酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠轉酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠轉酶試劑盒、小鼠轉酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠基轉移酶試劑盒   小鼠基轉移酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠基轉移酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠基轉移酶試劑盒、小鼠基轉移酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠表皮生長因子試劑盒   小鼠表皮生長因子試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠表皮生長因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠表皮生長因子試劑盒、小鼠表皮生長因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠棒狀桿菌試劑盒   小鼠棒狀桿菌試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠棒狀桿菌試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠棒狀桿菌試劑盒、小鼠棒狀桿菌eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人腦靜脈血管平滑肌原代細胞小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA 試劑盒

Human serine / threonine protein phosphatase (STK) ELISA Kit 人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒

HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 人溶血補體(Hc)試劑盒 進口分裝

Humanapoptosisinducingfactor,AIF試劑盒人凋亡誘導因子(AIF)試劑盒

植物葉片高質化葉綠體分離試劑盒10次

HumaissuePolypeptideAigen，TPAELISAKit人組織多肽抗原(TPA)試劑盒

TNFSF12重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ELK1 細胞轉錄因子ELK1抗原 0.5mgELK1 細胞轉錄因子ELK1抗原

GADD45A重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白

PECAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白