小鼠精原干原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 球形

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠精原干細胞分離自睪丸組織；精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞，是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些優勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染，異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養。在哺乳動睪丸內，精子發生時一個受高度調控和持續的過程，精原干細胞（SSCs）一方面進行自我更新維持干細胞數量，另一方面又不斷執行分化成各級生精細胞直至后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發生的原始細胞，也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養體系的建立，在生物學、醫學、畜牧業生產及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群細胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠精原干細胞采用先機械吹打、后蛋白酶消化，結合Percoll密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠精原干細胞經CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

SW-13細胞，腎上腺皮質腺癌細胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細胞 人肺癌細胞  NSC，大鼠神經干細胞 人腦視神經膠質瘤細胞，Hs 683細胞 RF/6A(猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞)  kasumi-1, 人白血病細胞株 人原代子宮蛻膜基質細胞 人原代頸靜脈球瘤細胞

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗原

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit

Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒

粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M

體液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitAE禽腦脊髓

心肌鈣蛋白 (c)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

CXCL8(CXCL-8)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

結蛋白 (Desmin)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

雌三醇 (E3)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠精原干原代細胞豬血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒

Human myogenin (MYOG) ELISA Kit 人肌細胞生成素(MYOG)試劑盒

RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-PIVIgM(Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody)ELISAKit人抗副流感病毒IgM抗體

血液5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量試劑盒20次

PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒

TF重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白  Protein

干擾素誘導內質網關聯病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白 Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)

MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標簽)

FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 標簽)