小鼠腦成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠腦成纖維細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腦成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腦成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

T84(人結腸腺癌肺轉移細胞)   tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL  家貓肺細胞;FCA-L2  OCM-1A細胞，人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞 綠色木霉 人原代子宮內膜干細胞 小鼠原代腹腔巨噬細胞

TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)

KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標簽) Protein

MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠鉤端IgG(Leptospira IgG)試劑盒 ，英文名： Leptospira IgG ELISA Kit

Porcine ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 豬白介素10(IL-10)試劑盒

甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIC-1humanELISAkit人巨噬細胞抑制因子-1試劑盒

體液鎂離子(Mg)濃度化學比色法定量試劑盒50次

ELISAKitSAA牛血清樣蛋白A

異育銀鯽趨化因子CCL5   英文名稱：   Freshwater fish Chemokine C-C motif ligand 5   規格：      英文縮寫：   CCL-5

異育銀鯽免疫球蛋白D   英文名稱：   Freshwater fish Immunoglobulin D   規格：      英文縮寫：   IgD

異育銀鯽免疫球蛋白M   英文名稱：   Freshwater fish Immunoglobulin M   規格：      英文縮寫：   IgM

異育銀鯽白細胞間介素22   英文名稱：   Freshwater fish Ierleukin 22   規格：      英文縮寫：   IL-22

小鼠腦成纖維原代細胞鴨子胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒

Human ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 人抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAD(Humanamiodarone)ELISAKit人呋同

血液總乳酸比色法定量試劑盒20次

Mouseprostatespecificaigen,PSAELISAKit小鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒

SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標簽)

SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。