詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AG1024 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
AG-1024(Tyrphostin)能抑制IGF-1R自磷酸化,IC50為7μM,而對IR的IC50則為57μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:65678-07-1 別名:Tyrphostin AG 1024 純度:99.47% 分子量:305.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
松杉靈芝大鼠內源性糖皮質激Anti-NDRG4 Antibody人組織蛋白K(cath-K)
葡萄座腔菌大鼠檸檬合Anti-NDUFA4L2 Antibody人組織蛋白K(cath-K)
釀酒酵母兔子血小板因子4Anti-NDUFA9 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)
爪哇鏈霉菌植物維生CAnti-NDUFA4L2 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)
矩圓黑盤孢小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6Anti-NDUFA8 Antibody人視黃結合蛋白4(RBP-4)
sto128(大球蓋菇)人集落激因子Anti-NDUFB1 Antibody人視黃結合蛋白4(RBP-4)
灰藍毛霉兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白Anti-NDUFB9 Antibody人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)
污水溶桿菌人γ干擾誘導單核因子Anti-NDUFS5 Antibody人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)
深紅酵母α-銀環蛇Anti-NDUFB10 Antibody人垂草扁桃(VMA)
煙曲霉小鼠巨噬炎性蛋白1δAnti-NDUFA9 Antibody人垂草扁桃(VMA)
黑曲霉大鼠L-鼠乳脫氫Anti-NDUFC2 Antibody人葡萄糖激調節蛋白(GKRP)
腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型大鼠脂酰合成Anti-NDUFV3 Antibody人葡萄糖激調節蛋白(GKRP)
黑曲霉人肥胖抑制Anti-NECTIN1 Antibody人血凝(HA)
根瘤菌屬小鼠肺部活化調節趨化因子Anti-NDUFV2 Antibody人血凝(HA)
克魯斯假絲酵母兔子中性粒彈性蛋白Anti-NECAB3 Antibody人脂肪分化相關蛋白(ADRP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種蘇云金芽孢桿菌蛋白Anti-NECTIN2 Antibody人脂肪分化相關蛋白(ADRP)
鳥核苷交換因子抗體黑荊樹根瘤菌人膀胱癌細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)
核糖體結合因子RBFA抗體中國臺灣相思根瘤菌人絨毛膜癌細胞
環指蛋白166抗體南洋楹根瘤菌小鼠白血病克細胞系
環指蛋白19B抗體假木豆根瘤菌人子宮內膜腺癌細胞
IGF-1R自磷酸化抑制劑(AG1024)米曲霉 脫氧鴨嘴花堿酮
波多黎各鹽幾何形 Communic acid
匿名曲霉 丁香三環烷二
溝鞭藻赫夫勒氏 羥基大黃
蘇云金芽孢桿 羥基大黃
節桿 乙酸(肉)桂酯
大腸埃希氏 貓眼草 D
釀酒酵母 啤酒甾
銅綠假單胞 洋椿苦
大豆慢生根瘤 梓木內酯
簡單青霉 Biorobin
大腸埃希 內酯苷
黃傘 alpha-Spinasterol acetate
大田鞘氨盒 Agatholal
蒼白桿屬 阿夫兒茶精