小鼠胚胎成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠胚胎成纖維細胞分離自胚胎；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞，能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優于外源添加的一些因子，而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胚胎成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胚胎成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

TGFBR2 Others Rat 大鼠 TGFBR2 人細胞裂解液   HFL1(人肺成纖維細胞)     CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞)  脂肪細胞生長添加物PAGS  BRL(大鼠肝細胞)   K562/Adr 人白血病耐藥株 人原代主動脈內皮細胞 大鼠原代宮頸上皮細胞

Discs大同源物關聯蛋白5(DLGAP5)重組蛋白 Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5)

BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標簽)

IFNG重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (His 標簽) Protein

CNTFR Protein Rat 重組大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 蛋白 (His 標簽)

RTN4R重組人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)試劑盒 ，英文名： HDL3 ELISA Kit

Rabbit esadiol (E2) ELISA Kit 兔子雌二醇(E2)試劑盒

C組輪狀病毒(HRV-C)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHCELISAKit魚類主要組織相容性復合體

體液尿酸含量酶偶聯比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCS牛檸檬酸合成酶

心血管活性多肽   英文名稱：   Apelin   規格：      英文縮寫：   AP

轉錄因子AP-1   英文名稱：   anscription Factors AP-1   規格：      英文縮寫：   AP-1

0酸化AKT蛋白   英文名稱：   phosphorylation AKT   規格：      英文縮寫：   p-AKT

晚期糖基化終末產物   英文名稱：   advanced glycosylation end products   規格：      英文縮寫：   AGEs

小鼠胚胎成纖維原代細胞豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA 試劑盒

Human maix Gla protein (MGP) ELISA Kit 人基質γ羧基谷蛋白(MGP)試劑盒

RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-HDV(Humanai-hepatitisDvirusaibody)ELISAKit人抗丁型肝病毒抗體

血液D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次

PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit豬透明質酸(HA)試劑盒

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 Protein

Leptin 瘦素(抗原 0.5mgLeptin 瘦素(抗原)

CD59重組人 CD59 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

IL1R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。