小鼠乳腺成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數可以重復經歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結締組織對乳房起固定作用，而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠乳腺成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠乳腺成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液   CD1E & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液   CD2 Others Human 人 CD2 人原代支氣管平滑肌細胞 小鼠原代頸動脈平滑肌細胞

Leptin 瘦素(抗原 0.5mgLeptin 瘦素(抗原)

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 Protein

IL1R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽)

CD59重組人 CD59 蛋白 Protein

大鼠肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)試劑盒 ，英文名： c-MET/HGFR ELISA Kit

Porcine ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 豬白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒

傷寒桿菌(ST)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMDA(Mousemalondialchehyche)ELISAKit小鼠二

體液羥賴(HYL)含量比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCholicacid牛膽酸

溴甲酚紫   5g

BromocresolPurple,FreeAcid   25g

溴酚蘭   10g

BromophenolBlue   50g

小鼠乳腺成纖維原代細胞豬雌二醇(E2)ELISA 試劑盒

Human macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒

PorcineOrexieceptor,OXRELISAKit 豬食欲素受體(OXR)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALP-BELISAKit大鼠骨特異性堿性0酸酶B

血液0酸甲戊二羥酸激酶(phosphomevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein

Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原

MFGE8重組人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標簽)

CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)