小鼠胰腺星狀原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、酶原、脂肪酶、酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞，PSC分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態與激活態兩種，并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC胞質內富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin。激活狀態PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發現，原代分離的細胞培養6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養時間的增長和傳代次數的增加，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養第6d大多數細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發現：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導致細胞形態、功能發生變化，促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich  中國倉鼠卵巢細胞;CHO  人胎兒細胞株;HFT-8810 [HFT8810]  非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A  CHL(倉鼠肺細胞)  CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 小鼠誘導性多潛能干細胞 人原代下腔靜脈平滑肌細胞 大鼠原代肝外膽管上皮細胞

β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白

CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 Protein

CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 Protein

大鼠分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)試劑盒 ，英文名： SFRP5 ELISA Kit

Rat beta hydroxybyric acid (beta OHB) ELISA Kit 大鼠β羥(βOHB)試劑盒

RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 大鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforDPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氫酶樣2

細胞葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量試劑盒50次

Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細胞生長因子(HGF)試劑盒

勻漿制作或抽提   Homogenate production or exaction

（皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品）   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)

超氧化物歧化酶（SOD）檢測   Superoxide dismase (SOD) detection

二（MDA）檢測   Malondialdehyde (MDA) detection

小鼠胰腺星狀原代細胞小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 人可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒

Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit 人細胞角蛋白19(CK-19)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Human6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit人6同前列腺素F1a

飲料D-葡萄糖酸鹽比色法定量試劑盒20次

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rhBMP-2/BMP2 重組人骨形態發生蛋白-2 100ugrhBMP-2/BMP2 重組人骨形態發生蛋白-2

CCNA1重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白 Protein

CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白

HAPLN1 Protein Human 重組人 HAPLN1 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。