小鼠直腸平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠直腸平滑肌細胞分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以而終。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式；腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6  CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細胞裂解液   NELL2 Others Human 人 NELL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 人原代外周血間充質干細胞 大鼠原代主動脈外膜成纖維細胞

AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

EFNA5重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白

IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein

大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)試劑盒 ，英文名： TSLC1 ELISA Kit

Porcine soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMAO(Humanmonoamineoxidase)ELISAKit人單胺氧化酶

體液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitSAA血清樣蛋白A

血清樣蛋白   英文名稱：   serum amyloid A protein   規格：      英文縮寫：   SAA

Salusin-α   英文名稱：   Salusin-α   規格：      英文縮寫：   Salusin-α

干細胞因子   英文名稱：   stem cell factor   規格：      英文縮寫：   SCF

干細胞因子受體   英文名稱：   stem cell factor receptor   規格：      英文縮寫：   SCF R

小鼠直腸平滑肌原代細胞小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai apolipoprotein aibodies A1 (Apo A1) ELISA Kit 人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)試劑盒

HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 人抗著絲點抗體(ACA/CENP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAA(HumanArachidonicAcid)ELISAKit人花生四烯酸

乙醇沉淀法DNA萃取試劑盒20次

MouseNervegrowthfactor,NGFELISAKit小鼠神經生長因子(NGF)試劑盒規格：96T/48T

IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein

酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白