小鼠下頜骨成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠口腔粘膜成纖維細胞分離自下頜骨組織；下頜骨位于面下部，呈弓形，圍成口腔的前壁和側壁，是面部能活動的骨骼；其水平部分為下頜體，其垂直部分為下頜支，表層為骨密質，內部為骨松質，與顳骨關節凹組成顳下頜關節。下頜體分內、外兩面及上、下兩緣。下頜支分兩面、四緣及兩突。下頜支與顳骨形成關節。該關節非常靈活，可做出包括咀嚼動作在內的多種動作下頜骨的骨小梁也順應咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列，斜向上后排列成線形；下頜骨的骨質較致密，血供較差，除主要接受下齒槽動脈血供外，又接受來自骨表面黏骨膜動脈分支的血液。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠下頜骨成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠下頜骨成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

U-87 MG(人神經膠質瘤細胞)  小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS  BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細胞裂解液   CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細胞裂解液 人原代雪旺細胞 兔原代骨細胞

HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta 0.5mgHSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)

CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc & FLAG 標簽)

PDGFC重組食蟹猴 PDGF-C / PDGFC 蛋白 (Fc 標簽) Protein

SEMA3A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽)

CA4重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 Protein

大鼠鈣結合蛋白(CR)試劑盒 ，英文名： CR ELISA Kit

Porcine factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 豬凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒

轉基因植物TE基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCF(Humanmacrophagechemotaticfactor)ELISAKit人巨噬細胞趨化因子

體液血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitGH馬生長激素

蔗糖合成酶（SS)測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

蔗糖0酸合成酶（SPS)測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

酸性轉化酶（AI）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

轉化酶（NI）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

小鼠下頜骨成纖維原代細胞小鼠心肌營養素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒

Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 人腺苷脫氨酶(ADA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickencarbonicanhydrase,CA試劑盒雞酶(CA)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-10蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)試劑盒規格：96T/48T

ASAH2重組小鼠 ASAH2 蛋白 (His 標簽) Protein

Cholesterol 膽 100gCholesterol 膽

PAK3重組人 PAK3 蛋白 (His 標簽) Protein

ACO1 Protein Human 重組人 ACO1 / irp1 蛋白 (His 標簽)

KIRREL Protein Mouse 重組小鼠 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。