小鼠視網膜微血管周原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右；

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠視網膜微血管周細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網膜血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。周細胞（pericyte）又稱Rouget細胞和壁細胞，是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞，可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊，監視和穩定內皮細胞的成熟過程。此外，周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點之一，所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細胞連接，包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控；毛細血管受損時，周細胞還可增殖，分化為內皮細胞和成纖維細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠視網膜微血管周細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠視網膜微血管周細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL  NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)  人 APCDD1 人細胞裂解液   WM35, 人黑色素瘤細胞 神經母細胞瘤細胞, 人原代羊膜間充質干細胞 兔原代海綿體內皮細胞

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)

IL13重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 Protein

CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白

NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白  Protein

大鼠甘膽酸(CG)試劑盒 ，英文名： CG ELISA Kit

Porcine esogen (E) ELISA Kit 豬雌激素(E)試劑盒

轉基因植物35S基因核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMCP-4/CCL13(Mousemonocytechemotacticprotein4)ELISAKit小鼠單核細胞趨化蛋白4

體液糖類總量鐵比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIL-2綿羊白介素2

中文名稱   方法   規格

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISAKit   ELISA. 

小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISAKit   ELISA. 

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISAKit   ELISA.

小鼠視網膜微血管周原代細胞小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 人克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒

HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 人L苯解氨酶(PAL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor(n1)ELISAKit大鼠軸突生長誘向因子1

飲料污染ATP生物發光法定量試劑盒50次

MouseIerleukin-7,IL-7ELISAKit小鼠白介素7(IL-7)試劑盒

NTRK1重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原)

CTNNB1重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽)

CD36 Protein Mouse 重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。