人子宮平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人子宮平滑肌細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調節，其收縮活動有助于精子向輸卵管運送、經血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管，如果平滑肌層細胞過度生長，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，體外培養平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態，在孕期能大化的擴張子宮容積，保證胎兒孕育環境；②平滑肌細胞有收縮舒張能力，在生產時能形成生理性的縮腹環，推動胎兒向下移動，輔助生產。

方法簡介：

公司實驗室分離的人子宮平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人子宮平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

QSG-7701細胞，肝細胞 人結直腸腺癌上皮細胞,DLD-1細胞 CM-R053大鼠卵巢上皮細胞LYG1 Others Human 人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   Dami細胞，巨核細胞白血病細胞 兔原代冠狀動脈內皮細胞 大鼠原代骨髓內皮細胞

IFN- Gamma(Interferon Gamma 0.5mgIFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干擾素-γ多肽抗原(大、小鼠)

CALU Protein Human 重組人 CALU / Calumenin 蛋白

IFNA14重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

ADAM9 Protein Mouse 重組小鼠 ADAM9 蛋白

ECE2重組人 ECE-2 蛋白 Protein

大鼠活性氧調制因子1(ROMO1)試劑盒 ，英文名： ROMO1 ELISA Kit

Rabbit Adramycin (ADR) ELISA Kit 兔(ADR)試劑盒

猴痘病毒(MPV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMousereducedglathione,GSHELISAKit小鼠還原型

體液甘油三酯(iglyceride)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次

ELISAKit5-HIAA人5羥基吲哚乙酸

轉化生長因子 -β2(TGF- b 2)   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender

血栓調節蛋白 (Thrombomodulin/sCD141)   作用：   ELISA   規格：   96T   法國 Diaclone

基質金屬蛋白酶抑制因子 -1(TIMP-1)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

基質金屬蛋白酶抑制因子 -2(TIMP-2)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

人子宮平滑肌原代細胞豬內皮型合酶(eNOS)試劑盒

Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素

血液S轉移酶(GSHST)總活酶動力性比色法定量試劑盒20次

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒

IFNA4重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Melamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mgMelamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物

S100A8重組人 S100A8 / CAGA 蛋白 Protein

CARHSP1 Protein Human 重組人 CARHSP1 蛋白

VDR Protein Mouse 重組小鼠 VDR / NR1I1 蛋白