兔膀胱成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織；膀胱是一個儲尿器官，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結構，位于骨盆內，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成，由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成，稱為逼尿肌，逼尿肌收縮，可使膀胱內壓升高，壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌，形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌、膀胱三角區肌）和黏膜層（極薄的一層移行上皮組織）。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原，研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來，堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔膀胱成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔膀胱成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細胞裂解液   EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液   CM-H102表皮角化細胞幼蚊細胞;C6/36  MFC   小鼠胃癌細胞 兔原代鞏膜成纖維細胞 小鼠原代主動脈弓內皮細胞

HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導因子1β 抗原

CANX Protein Human 重組人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 標簽)

NXPH1重組大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein

CD300A Protein Mouse 重組小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 標簽)

PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein

大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)試劑盒 ，英文名： Alox5 ELISA Kit

Rabbit ai glycoprotein aibody (GP) ELISA Kit 兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒

登革熱病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白

體液環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitCTX-Ⅰ人Ⅰ型膠原C端肽

豬藍耳病（PRRS）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬狂犬病毒抗體（RV-ab）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬口蹄疫病毒（FMDV）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔膀胱成纖維原代細胞羊促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒

Human ai teichoic acid aibody (TA) ELISA Kit 人抗0壁酸抗體(TA)試劑盒

HumanVitaminB12,VB12ELISAKit 人B12(VB12)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforADAMTS4(HumanADAMmetallopeptidasewiththrombospondiype1motif4)ELISAKit人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4

血液游離酶連續循環比色法定量試劑盒20次

MousePyruvateKinase,M2-PKELISAKit小鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)

RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標簽) Protein

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)

GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標簽)