兔肌腱成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔肌腱成纖維細胞分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構成，色紅質軟，有收縮能力，肌腱由致密結締組織構成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發力和耐力。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肌腱成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肌腱成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

rCSC, 大鼠心肌細胞  OVCAR-3(人癌細胞)     中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1  人少突膠質細胞 人肺癌細胞，SK-MES-1細胞 P3X63Ag8.653(骨髓瘤細胞)  RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 兔原代股骨頭微血管內皮細胞 羊原代支氣管上皮細胞

Melamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mgMelamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物

CARHSP1 Protein Human 重組人 CARHSP1 蛋白

IFNA4重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

VDR Protein Mouse 重組小鼠 VDR / NR1I1 蛋白

S100A8重組人 S100A8 / CAGA 蛋白 Protein

大鼠環加氧酶1(COX-1)試劑盒 ，英文名： COX-1 ELISA Kit

Rabbit ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒

登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitformouseIgGELISAkit小鼠免疫球蛋白IgG

體液環氧化酶(CYCLOOXYGENASE)總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitⅠCTP人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽

豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管內皮細胞生長因子A（VEGF-A）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔肌腱成纖維原代細胞鴨α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human adrenal coex aibody (AAA) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質抗體(AAA)試劑盒

HumanFolicacid,FAELISAKit 人(FA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAChEELISAKit大鼠乙酰酯酶

藥品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次

Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒規格：96T/48T

CD52重組大鼠 CD52 / CDW52 蛋白  Protein

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

UNG重組人 Uracil-DNA glycosylase / UNG 蛋白 (GST 標簽) Protein

ASGR2 Protein Human 重組人 ASGR2 蛋白 (His 標簽)

DLL1 Protein Mouse 重組小鼠 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 標簽)