小鼠腸平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠小腸平滑肌細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。小腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤，是小腸結締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此，體外小腸平滑肌細胞的培養對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外，體外培養細胞，由于影響因素較為單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腸平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腸平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

Sf-21(昆蟲細胞)  人 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   THLE-3人肝永生化細胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM(目錄號CC3170)  5E Others Mouse 兔原代肺肌成纖維細胞 小鼠原代單核細胞

midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原 0.5mgmidnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原)

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)

IL18RAP重組食蟹猴 IL18RAP 蛋白 (His 標簽) Protein

FCRL1 Protein Mouse 重組小鼠 FCRL1 / FCRH1 蛋白 (His 標簽)

PI3重組人 PI3 / Elafin / WFDC14 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 ，英文名： PPAR-α ELISA Kit

Rabbit acetylcholine (ACh) ELISA Kit 兔乙酰(ACh)試劑盒

柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸試劑盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMMSAM(Humanmelanomametastasissurfaceadhesionmolecule)ELISAKit人黑色素瘤轉移表面黏附分子

體液基質金屬蛋白酶(MMP)總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitFA犬

豬主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒   豬主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒   規格型號：96T/48T   豬主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒、豬主要組織相容性復合體Ⅰ類eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬轉化生長因子β2試劑盒   豬轉化生長因子β2試劑盒   規格型號：96T/48T   豬轉化生長因子β2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬轉化生長因子β2試劑盒、豬轉化生長因子β2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬總試劑盒   豬總試劑盒   規格型號：96T/48T   豬總試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬總試劑盒、豬總eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬組胺試劑盒   豬組胺試劑盒   規格型號：96T/48T   豬組胺試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬組胺試劑盒、豬組胺eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠腸平滑肌原代細胞植物吲哚乙酸(IAA)ELISA 試劑盒

Human ai parainfluenza virus IgG aibody (ai-PIV IgG) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgG抗體(ai-PIV IgG )試劑盒

PorcineImmunoglobulinE,IgEELISAKit 豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFU(Humanalpha-L-fucosidase)ELISAKit人αL巖藻糖苷酶

血液糖原酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次

Mousethyroopin-releasinghormone,HELISAKit小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 標簽) Protein

Cdc34 peptide 細胞周期調控因子34抗原 0.5mgCdc34 peptide 細胞周期調控因子34抗原

ADK重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

BCL6 Protein Human 重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標簽)

SELL Protein Mouse 重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標簽)