小鼠肺大靜脈平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個肺循環系統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環，才能避免肺動脈內壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應，保持靜脈管腔的通暢，還是多數動脈疾病的靶細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肺大靜脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肺大靜脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

SHZ-88細胞，癌細胞 人肥大細胞白血病細胞,CHMAS細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1036  Hs 578T(人癌細胞)     293A，人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別) 小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)，3T3L1細胞 Hs 683 兔原代單核細胞 兔原代腎上腺髓質細胞

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原

CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽)

EREG重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL18R1 Protein Rat 重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽)

ING5重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽) Protein

大鼠胱抑素SA(CST2)試劑盒 ，英文名： CST2 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 兔載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒

甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-7ELISAkit大鼠基質金屬蛋白酶7

體液基質金屬蛋白酶(MMP-10)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitICAM-1/CD54犬細胞間粘附分子1

氧化酶（XOD）測試盒（比色法）

植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)

（VitaminE）測定試劑盒（比色法）

超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒

小鼠肺大靜脈平滑肌原代細胞豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒

Human maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒

Rabbitmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit 兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-DNaseB(Humanai-deoxyribonucleaseB)ELISAKit人抗DNA酶B抗體

血液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量試劑盒20次

PorcineHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 (His 標簽) Protein

低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)

ATP5D重組人 ATP5D 蛋白 (His 標簽) Protein

ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白