小鼠角膜基質原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠角膜基質細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜基質層是角膜的主要組成部分，占據角膜厚度的90%，由角膜基質細胞、膠原纖維和細胞外基質構成。角膜基質層缺損的修復主要由角膜基質細胞的增殖及分泌細胞外基質完成。角膜基質層具有結構規整，透明度高的特點，正常情況下角膜基質細胞分泌組成基質層的成分，維持角膜的透明度，此細胞對于角膜損傷的修復具有重要意義。角膜基質細胞，存在于角膜基質層中，在正常情況下，處于靜止狀態。但當角膜損傷時，不同上皮來源的因子及環境信號，將影響角膜基質細胞的應答反應，決定著角膜能否被修復。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠角膜基質細胞采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠角膜基質細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)  小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   RBE(人膽管癌細胞)     FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細胞裂解液 人真皮毛乳頭細胞永生化細胞 小鼠原代脂肪細胞

DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽

BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽)

MBL1重組大鼠 MBL1 蛋白  Protein

THSD1 Protein Mouse 重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 標簽)

GOLM1重組人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠谷酰胺合成酶(GLUL)試劑盒 ，英文名： GLUL ELISA Kit

Rabbit ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒

大腸桿菌(O157:H7)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Beta)ELISAkit人巨噬細胞性蛋白1β

體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKit5-HT犬5羥色胺

小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠角膜基質原代細胞小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble adenylate cyclase (sAC) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸環化酶(sAC)試劑盒

HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 人纖維母細胞表面抗原(FSP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3ELISAKit大鼠25羥基3

飲料果膠生物酶比色法定量試劑盒20次

Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit小鼠脂蛋白相關0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規格：96T/48T

TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)重組蛋白 Recombinant Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4)

GFER重組人 GFER / ALR 蛋白 (His 標簽) Protein

CADM3 Protein Human 重組人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)