詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:細胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)
英文名稱:MMAF Hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
MMAF hydrochloride是抑制細胞分裂的抗微管蛋白劑;抑制H3397細胞生長的IC50值為105nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1415246-68-2 別名:Monomethylauristatin F Hydrochloride 純度:98.96% 分子量:768.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS19EB 病 IgG(間接法二步法)Anti-MDM2 Antibody人降鈣基因相關肽(CGRP)
孟氏假單胞菌EB 病 IgM(間接法二步法)Anti-MDM4 Antibody人降鈣基因相關肽(CGRP)
Leucobacter kyeonggiensis肺炎支原體 IgG(間接法二步法)Anti-MECP2 Antibody人生長抑(SS)
Nocardioides simplex肺炎支原體 IgM(間接法二步法)Anti-ME1 Antibody人生長抑(SS)
球孢枝孢流感病A IgG(間接法二步法) Anti-ME3 Antibody人生長激釋放多肽(GHRP)
平菇流感病A IgM(間接法二步法)Anti-MED1 Antibody人生長激釋放多肽(GHRP)
萎蔫短小桿菌付流感病 IgG(間接法二步法)Anti-MED13L Antibody人抑制B(INH-B)
蓋替隱球酵母付流感病 IgM(間接法二步法)Anti-MED14 Antibody人抑制B(INH-B)
空泡單胞菌流行性出血熱病 IgG(間接法二步法)Anti-MED13 Antibody人促甲狀腺釋放激(TRH)
環形凸臍蠕孢流行性出血熱病 IgM(間接法二步法)Anti-MECP2 Antibody人促甲狀腺釋放激(TRH)
枯草芽孢桿菌流行性腮腺炎病 IgG(間接法二步法)Anti-MED18 Antibody人雌激(E)
葡萄座腔菌流行性腮腺炎病 IgM(間接法二步法)Anti-MED21 Antibody人雌激(E)
無二檸檬桿菌乙型腦炎病 IgG(間接法二步法)Anti-MED24 Antibody人褪黑(MT)
傳染性支氣管炎病乙型腦炎病 IgM(間接法二步法)Anti-MED23 Antibody人褪黑(MT)
不動桿菌人絨毛膜促性腺激(夾心法一/二步法)Anti-MED23 Antibody人6前列腺(6-K-PG)
玫瑰考克氏菌魚類白介1βAnti-MEF2B Antibody人6前列腺(6-K-PG)
Rab蛋白GTP激活蛋白1抗體燼灰鏈霉菌人伯基特淋巴瘤細胞
c-Myc應答蛋白抗體產色鏈霉菌人胎盤絨膜癌細胞
環指蛋白157抗體白色鏈霉菌人涎腺癌細胞
G蛋白相關RABX5抗體大團囊蟲草615小鼠網織細胞性白血病瘤株
細胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)黑色附球 6β-Hydroxyipolamiide
假單胞屬 6-O-p-Hydroxybenzoylaucubin
熒光假單胞 6-甲氧基柚皮
赭色擲孢酵母 6a-Hydroxymaackiain
放射桿狀根瘤 6-Acetonyldihydrosanguinarine
英諾克李斯特氏 6-Acetonyldihydrochelerythrine
豇豆慢生根瘤 6,8-二異戊烯基金雀異黃
串珠鐮孢 5-O-Methylnaringenin
樹舌靈芝(平蓋靈芝) 5-O-Methylhierochin D
尖頂絲膜 5-羥基-7-乙酰氧基黃酮
產氣莢膜梭 C型 5-Dehydroxyparatocarpin K
中華散尾鬼筆 5-乙酰氧基-7-羥基黃酮
阪崎腸桿 5,7-Dihydroxy-6,8-dimethoxyflavo
釀酒酵母 5,7-二乙酰氧基黃酮
枯草芽孢桿 5,7-Diacetoxy-8-methoxyflavone