詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:廣譜PI3K抑制劑(LY294002)
英文名稱:LY294002
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:LY294002 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg LY294002是一種廣譜PI3K抑制劑,抑制PI3Kα/δ/β,IC50分別為0.5/0.57/0.97μM,也抑制CK2,IC50為98nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:154447-36-6 別名:NSC 697286;SF 1101 純度:99.97% 分子量:307.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
根瘤菌19號染色體開放閱讀框42抗體Human ATG4B ELISA Kit人組織蛋白C(CTSC)免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌19號染色體開放閱讀框44抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒
釀酒酵母19號染色體開放閱讀框48抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白乙酰化(HAT)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌19號染色體開放閱讀框50抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人組蛋白脫乙酰化2(HDAC2)免疫試劑盒
長枝木霉19號染色體開放閱讀框51抗體Human ATIC ELISA Kit人組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒
硬水黃桿菌19號染色體開放閱讀框52抗體Human ARP2 ELISA Kit人組蛋白去乙酰化(HDAC)免疫試劑盒
Bacillus anthracis19號染色體開放閱讀框55抗體Human ATR ELISA Kit人組蛋白賴N-甲基轉移SETD7(SETD7)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌19號染色體開放閱讀框56抗體Human ATG4B ELISA Kit人組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒
四川散斑殼19號染色體開放閱讀框57抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
玉蕈離褶傘19號染色體開放閱讀框61抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組(HIS)免疫試劑盒
黑曲霉19號染色體開放閱讀框77抗體Human ATIC ELISA Kit人足標記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒
產棒桿菌核DNA結合蛋白C1D抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人總蛋白S(TPS)免疫試劑盒
奧氏蜜環菌1號染色體開放閱讀框58抗體Human ARP2 ELISA Kit人總蛋白C(TPC)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌21號染色體開放閱讀框66抗體Human AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA Kit人自然抗性相關巨噬蛋白2(NRAMP-2)免疫試劑盒
嗜低鹽適鹽菌CDC42效應蛋白3抗體Human ATR ELISA Kit人自然抗性相關巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種7號染色體開放閱讀框43抗體Human ARP3 ELISA Kit人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒
魯酵母Saccharomyces│rouxii 質量規格:>98%,BRN-乙酰-β-D-基葡萄糖苷試劑盒柯諾辛
: Le-114,廣東微生物所46資源名稱: 香菇 質量規格:BRN-基-D-天冬受體試劑盒奎寧
樹狀假絲酵母Candida│arborea 質量規格:BRN鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白試劑盒苦馬豆
廣譜PI3K抑制劑(LY294002)根瘤 4-羧基-3-氟苯酸內皮型一氧化氮合Elisa
蘇云金芽孢桿肯尼亞亞種 3--5-氟苯酸內源性糖皮質Elisa
Paecilomyces formosus 4-羧基-3-苯酸內脂Elisa
福氏志賀氏 4-羧基苯酸頻哪酯內質網應激相關蛋白CHOPElisa
金頂側耳 3-羧基苯酸頻哪酯黏著斑激Elisa
總狀共頭霉 2-頻哪酯鳥氨酸環化Elisa
層出鐮刀 環基溴化鎂鳥氨酸脫羧Elisa
平菇 環己基溴化鎂尿吡啶啉Elisa
大腸埃希 3-基二甲氧基硅烷尿蛋白Elisa
瓊氏不動桿 二苯基酸-2-氨基乙酯尿苷二磷酸葡萄糖酸轉移Elisa
植物乳桿 三正丁基疊氮化錫尿苷二磷酸葡萄糖酸轉移1Elisa
科氏葡萄球 4-氨酰苯酸尿苷二磷酸葡萄糖酸轉移2Elisa
靈芝 3-氨基苯酸鹽酸鹽尿肌酐Elisa
哈茨木霉 3-甲酰氨苯酸尿激型纖溶原激活物Elisa
葡萄座腔 5-乙酰基噻吩-2-酸尿皮質2Elisa