詳細介紹
商品介紹:
DEL-22379抑制ERK二聚化,IC50值為0.5μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:181223-80-3 純度:99.84% 分子量:444.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DEL-22379 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
立枯絲核菌大鼠B淋巴瘤因子2Anti-OXR1 Antibody人β內酰(β-lactamase)
污黑腐皮殼大鼠CXC趨化因子受體3Anti-ORC1 Antibody人β內酰(β-lactamase)
棘孢小單孢菌小鼠腫瘤壞死因子βAnti-OSR2 Antibody人β甘露糖苷(β Manase)
Arenibacter sp.人食欲/阿立新BAnti-OVOL1 Antibody人β甘露糖苷(β Manase)
灰平鏈霉菌小鼠Ⅳ型膠原Anti-P2RY11 Antibody人β半乳糖苷(βGAL)
孢囊放線菌大鼠中性粒彈性蛋白Anti-P2RY13 Antibody人β半乳糖苷(βGAL)
立枯絲核菌人促睡眠肽Anti-P2RY4 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)
PET-22b人6-羥多巴Anti-P2RY14 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)
依諾斯類芽胞桿菌小鼠己糖激Anti-P2RY8 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)
枯草芽孢桿菌大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子Anti-P4HB Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)
宇佐曲霉小鼠脫氫E1Anti-p90 RSK1 Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)
新型隱球酵母原變種大鼠羥脯Anti-PACRG Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)
金黃桿菌屬人心納Anti-PABPC5 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)
榛色假單胞菌小鼠糖原合成激Anti-PABPC3 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)
地衣芽胞桿菌大鼠骨保護配體Anti-PACS1 Antibody人L解(PAL)
小孢根霉華變種人神經髓鞘蛋白Anti-PAK2 Antibody人L解(PAL)
RAS家族關聯結構域蛋白6抗體#牛肝菌屬人小氣道上皮細胞
Ras樣蛋白A抗體楊褐盤二孢多芽管轉化型人臍靜脈內皮細胞*培養基:(原代細胞)
Rh血型C抗原抗體松色二孢鼠神經母細胞瘤細胞
環指蛋白11抗體盤多毛孢菌小鼠輔助性T細胞
ERK二聚化抑制劑(DEL-22379)釀酒酵母 白果內酯
豬丹絲 和厚樸
格氏假單胞* 銀杏內酯C
金黃色隱球酵母 銀杏內酯B
靈芝 2,4-Dihydroxy-6-methoxyacetophen
氧化硫副球 2,2,6,6-四甲基酮鹽酸鹽
松口蘑 駱駝蓬堿
蘇云金芽胞桿 Gallocatechin
枯草芽孢桿 4-甲氧基
交鏈孢 黃瓦胡椒 A
土曲霉金色變種 乙基beta-D-吡喃葡萄糖苷
孟氏假單胞 Dihydroconiferyl alcohol
紅球 3,4-二甲氧基苯甲酰
Erwinia BETA-細辛腦
植物乳桿 辛可寧