小鼠浦肯野原代細胞公司正在銷售的產品：小鼠原代浦肯野細胞 293ET(人胚細胞（SV40T和EBNA1基因修飾細胞）) HMSC-bm 人間充質干細胞－骨髓 1ml/T75 Lewis 小鼠肺癌細胞 RES 大鼠胚胎皮膚成纖維樣細胞 人原代角膜基質細胞

小鼠浦肯野原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠浦肯野細胞分離自小腦皮質組織；小腦的表面被覆著一層灰質，叫小腦皮質，小腦皮質分為3層，從表及里分別為分子層、浦肯野細胞層和顆粒細胞層。皮質里含有星狀細胞、籃狀細胞、浦肯野細胞、高爾基細胞和顆粒細胞等5種神經元。浦肯野細胞發出的軸突組成小腦皮質的傳出纖維，終止于小腦白質內的神經核。浦肯野細胞（Purkinje cell）是從小腦皮質發出的能夠傳出沖動的神經元。人的小腦皮質約有1500萬個浦肯野細胞。浦肯野細胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點是傳導性強，傳導速度快，可達4000mm/s。屬快反應自律型細胞，具有舒張期自動除極化的性能，因而有自律性，但自律性強度明顯低于竇房結P細胞。這類細胞常常平行排列，細胞內電阻低，只有心室細胞的1/3。小腦：浦肯野細胞是小腦皮質中最大的神經元，細胞體呈梨形，頂端發出2~3條粗大的主樹突，向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂，形如展開的、扁薄的扇形，鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘，與傳入纖維構成廣泛的突觸聯系，接受傳入小腦的全部信息。軸突由細胞底部（與主樹突相對方向）發出，細長，離開胞體不遠便形成有髓神經纖維，向內經顆粒層離開皮質進入白質，組成小腦皮質的傳出纖維，終止于小腦內部的神經核團。一個浦肯野細胞的軸突約形成500個終末膨大，約與小腦深部核團的35個神經元形成突觸。心臟浦肯野細胞常常平行排列，幾個細胞互相以漿膜連接排成一個小束，小束外包繞著基底膜。細胞內含肌原纖維很少，胞漿區內充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網，細胞內電阻低，只有心室細胞的1/3。浦肯野細胞內無橫管系統，但膜電容比收縮細胞大，可能是由于其閏盤結構廣泛而復雜，提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細胞閏盤的主要成分是縫隙連接，粒著膜占的比例很少，這些可能是構成浦肯野細胞傳導快的形態學基礎。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠浦肯野細胞采用蛋白酶消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠浦肯野細胞經Neph3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

EL4IL-2細胞，淋巴瘤細胞 人急性早幼粒白血病細胞,NB4細胞 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)  NCI-H345細胞，人小細胞肺癌細胞 小鼠腦神經瘤細胞,Neuro-2a細胞 CM-H119人腦膜細胞人腦血管平滑肌細胞 小鼠原代角膜基質細胞 人原代尾椎腫瘤細胞

ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原

ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白

IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白

FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

大鼠乙酰轉移酶(ChAT)試劑盒 ，英文名： ChAT ELISA Kit

Porcine platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒

ELISA 小鼠Active Caspase-8  進口分裝

CLIAKitforLPA(MouseL-phenylalanine)ELISAKit小鼠苯

通用型1毫升1厘米光徑石英比色皿1個

ELISAKitEGF雞表皮生長因子

兔內皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔內啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠浦肯野原代細胞小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒

Rat thrombin receptor () ELISA Kit 大鼠受體()試劑盒

HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)試劑盒 進口分裝

HumanAialNaiureticPeptide,ANP試劑盒人心肽(ANP)試劑盒

植物源性食品羽扇豆(lupine)試劑盒20次

Humahrombopoietin，TPOELISAKit人血小板生成素(TPO)試劑盒

RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein

HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標簽)

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標簽)