詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:RAD51抑制劑(RI-1)
英文名稱:RI-1
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
RI-1是RAD51抑制劑,IC50在5到30μM之間。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:415713-60-9 純度:99.77% 分子量:361.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
谷棒桿菌熒光標記豬胰島蛋白Anti-HGFAC Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
頭狀禿馬勃熒光標記雞卵白蛋白Anti-HGH1 Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
綠黃鏈霉菌熒光FITC標記兔IgG(流式同型對照)Anti-HGH1 Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
Aeromonas aquariorum熒光標記牛IgGAnti-HIBADH Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
林生毛霉熒光標記牛IgMAnti-HIF3A Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
澳型核果褐腐病菌熒光標記雞IgGAnti-Hip Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
密歇根棍狀桿菌標記亞種熒光標記雞IgMAnti-HIF3A Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
甜菜慢生根瘤菌熒光標記狗IgGAnti-HIPK4 Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
熱葡糖苷土芽孢桿菌熒光標記狗IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
欽海特德沃斯氏菌熒光FITC標記羊IgG(流式同型對照)Anti-HIST1H2BB Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
枯草芽孢桿菌熒光標記羊IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗環胍肽抗體(CCP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種熒光標記豚鼠IgGAnti-HIRA Antibody人抗環胍肽抗體(CCP)
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種熒光標記豚鼠IgMAnti-Histone H3 Antibody人抗核周因子抗體(APF)
多粘類芽胞桿菌熒光標記馬IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核周因子抗體(APF)
長柄條孢牛肝熒光標記馬IgMAnti-HK3 Antibody人抗核抗體(ANA)
乳桿菌屬熒光標記人IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核抗體(ANA)
紅細胞膜蛋白STOM抗體白腐菌人肝腹水腺癌細胞
鈉依賴性脯轉運PROT抗體小刺青霉大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細胞
基轉運蛋白2抗體產紫青霉人多發性骨髓瘤細胞(白介21基因修飾)
鈉離子通道蛋白7α/Na+CPtypeVIIα抗體淡紫青霉人小細胞肺癌細胞
RAD51抑制劑(RI-1)炭疽芽胞桿 2-巰基苯并噻唑
鮭色鎖擲酵母 吲唑
中慢生華癸根瘤 2-(4-叔丁基苯)-5-(4-聯苯基)-1,3,4-噁唑
白平195 苯并咪唑
干草鞘氨單胞 2-氨基苯并噻唑
洋蔥曲霉 2-氨基苯并咪唑
雜色曲霉 3-氨基-9-乙基咔唑
產氣莢膜梭 A型 鹽酸咪唑
釀酒酵母 咪唑
冷溫木克酵母 1,4-雙(5-苯基-2-惡唑)苯
大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二苯惡唑
釀酒酵母 氧化金
厭糖鹽土生古 乙酸銀
秦氏蜜環 硫酸銀
卵孢白僵 化銀
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)