小鼠乳腺上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠乳腺上皮細胞分離自乳腺組織；乳腺是復管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導管末梢發育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯系，體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠乳腺上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠乳腺上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

EPC, 大鼠血管內皮祖細胞  EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405  牦牛皮膚細胞;BMU-S1  CL-0014A-375(人惡性黑色素瘤細胞)  人腦血管周細胞 (HBVP)  人黑色素瘤細胞;A875 大鼠腸上皮細胞 100mL 小鼠原代脊髓星形膠質細胞 小鼠原代結腸成纖維細胞

pre-X protein(CT 0.5mgpre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端)

FGF7 Protein Human 重組人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 標簽)

NA重組甲型流感 H9N2 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

DPP4 Protein Human 重組人 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白

TNFRSF1A重組人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)試劑盒 ，英文名： REG4 ELISA Kit

Mouse endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白

細胞ARG/ABL2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitC4a大鼠過敏毒素/補體片斷4a

微量DNA凝膠回收試劑盒   50T

MiniELGelExactionKit   100T

微量樣品   50T

MiniEleDNAKit   100T

小鼠乳腺上皮原代細胞小鼠7α-羥化酶(CYP7A1)試劑盒 96T/48T

Human placeal alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)試劑盒

Humanai-thrombieceptor,AELISAKit 人抗受體(A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanAzidothymidine,AZT試劑盒人(AZT)試劑盒規格：96T/48T

植物源性飼料處理試劑盒20次

Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit人抗復合物(TAT)試劑盒規格：96T/48T

EGF重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽) Protein

70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)

MKI67重組人 MKI67 蛋白 (GST 標簽) Protein

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

ACE2 Protein Rat 重組大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白