詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SJB2-043 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
SJB2-043抑制USP1/UAF1復合體,IC50為544nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:63388-44-3 純度:99.30% 分子量:275.26 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
芽孢桿菌青霉G偶聯牛血清白蛋白Anti-HDAC-4(internal) Antibody人抗BB抗體(BB-Ab)
雜色曲霉青霉G偶聯雞卵白蛋白Anti-HDAC-9(internal) Antibody人抗BB抗體(BB-Ab)
嗜鹽長單胞菌 陽離子轉運蛋白2抗原Anti-HCK Antibody人抗平滑肌抗體(ASMA)
多主枝孢Anti-HDAC1 Antibody人抗平滑肌抗體(ASMA)
淡紫灰鏈霉菌Anti-HDAC2 Antibody人抗肝膜抗體(LMA)
枯草芽孢桿菌Anti-HDAC1 Antibody人抗肝膜抗體(LMA)
黃褐環銹傘Anti-HDAC4 Antibody人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)
大腸埃希氏菌Anti-HDAC10 Antibody人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)
釀酒酵母Anti-HDAC5 Antibody人抗眼肌抗體(EMAb)
鹽田鹽單胞菌Anti-HDAC5 Antibody人抗眼肌抗體(EMAb)
大豆慢生根瘤菌Anti-HDAC5 Antibody人抗補體1q抗體(C1q)
黃曲霉Anti-HDAC7 Antibody人抗補體1q抗體(C1q)
大腸埃希菌牛磺偶聯牛血清白蛋白(β-基乙磺)Anti-HDGFL3 Antibody人抗內因子抗體(IFA)
赭色栓菌熒光Cy5標記牛血清白蛋白Anti-HELZ2 Antibody人抗內因子抗體(IFA)
枯草芽胞桿菌枯草亞種熒光Cy5.5標記牛血清白蛋白Anti-HES2 Antibody人抗磷脂抗體(Apl/APA)
田無鏈霉菌熒光Cy3標記牛血清白蛋白Anti-HEXIM1 Antibody人抗磷脂抗體(Apl/APA)
唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1抗體根霉屬的菌人胎盤絨膜癌細胞
溶質載體蛋白家族35成員C2抗體中國臺灣根霉人子宮頸鱗狀細胞癌細胞
轉綠激活蛋白SRCAP抗體華根霉人高轉移卵巢癌細胞
神經元電壓門控鈉通道蛋白β2/Na+CPtypeIIβ抗體少根根霉人結直腸腺癌瘤株
USP1/UAF1復合體抑制劑(SJB2-043)枯草芽孢桿 鄰苯二甲酸氫
地下微球 鄰苯二甲酸氫
南雷夫松氏 芐脒鹽酸鹽
松口蘑 1,8-二羥基蒽醌
白色小環柄菇 1,4-二羥基蒽醌
鮑魚菇 苊醌
圍小叢殼 蒽醌
釀酒酵母 縮二脲
熱生腫塊芽孢桿 四氧嘧啶
蠟狀芽孢桿 羥基脲
巴氏蘑菇(姬松茸) 槲皮
葡萄汁酵母 尿囊
假單孢 膽紅
大豆慢生根瘤 尿
膠韌革 咔唑