小鼠神經少突膠質前體原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2天半量換液1次

生長特性 貼壁

細胞形態 雙極、多極形

傳代特性 不傳代，不增值，存活1-2周

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠神經少突膠質前體細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。少突膠質細胞分布于中樞神經系統，在銀浸染標本中，少突膠質細胞比星狀膠質細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。少突膠質細胞（oligodendrocyte）是中樞神經系統（CNS）的成髓鞘神經膠質細胞，其發育要經歷少突膠質細胞祖細胞、前少突膠質細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質細胞等階段。有學者將少突膠質細胞按其發育程度和形態分為三型。但是，細胞發育是一個連續的過程，其形態、表達產物和功能的演變沒有嚴格的界限，因此，其分類是相對的。這三型分別為：Ⅰ型少突膠質細胞又稱前O2A（pre-O2A progenitor cell）。細胞呈圓形，表面光滑，直徑約3μm，體外混合培養時成簇生長在星形膠質表面，具有很強的分裂增殖潛力，表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突膠質細胞胞體常有雙極或三極突起，極少數為單極突起，直徑約7μm，有一定的分裂增殖能力。體外培養時為雙潛能細胞，既可分化為少突膠質細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質，故又稱為少突膠質細胞-Ⅱ型星形膠質祖細胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ（淋巴雜交瘤株A2B5產生GQ的抗體），故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質細胞不再具有分裂增殖能力，為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據其形成髓鞘的能力，又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質細胞。不成熟的OL胞體常伸出4～5條較粗大突起，表面還殘留有A2B5標記物，同時也表達O1-O4抗原，無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質細胞突起有如蜘蛛網，大量表達半乳糖腦苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有對軸突髓鞘化的能力。體外培養的少突膠質細胞前體細胞（簡稱少突膠質細胞前體細胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質細胞，前兩者具有增殖能力。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質細胞采用蛋白酶消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質前體細胞經A2B5免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液   TE-10細胞，人食管癌細胞 人腦膠質母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1  CM-M001小鼠肺微血管內皮細胞原代內皮細胞培養特制添加劑 小鼠原代脊髓成纖維細胞 兔原代頸靜脈內皮細胞

FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原

FGFR2 Protein Human 重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 標簽)

KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)試劑盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit

Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人細胞周期素D3

細胞AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitON大鼠骨粘連蛋白

脫氧核糖核酸酶I   100mg

DNaseI,frombovinepancreas

三0酸脫氧核苷酸混合溶液   10x0.5ml

dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)   100x0.5ml

小鼠神經少突膠質前體原代細胞小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T

Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒

Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經酶(NA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞樣品蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規格：96T/48T

LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein

血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白

GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標簽)