詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CARM1-IN-1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CARM1-IN-1是CARM1高效選擇性抑制劑,IC50值為8.6uM,對PRMT1和SET7抑制活性很抵。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1020399-49-8 純度:95.09% 分子量:555.26 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
類干酪乳桿菌人葡萄糖轉運蛋白3Anti-Wnt1 Antibody小鼠17羥皮質類固(17-OHCS)
新疆黃桿菌人視黃結合蛋白Anti-WEE2 Antibody小鼠白介1α(IL-1α)
麥根腐平臍蠕孢人8羥基脫氧鳥苷Anti-WTAP Antibody小鼠白介1α(IL-1α)
綠僵菌人羥賴Anti-WRNIP1 Antibody小鼠白介2(IL-2)
擬青霉屬人GTP活化蛋白Anti-XPA Antibody小鼠白介2(IL-2)
副豬嗜血桿菌人載脂蛋白HAnti-XPA Antibody小鼠白介4(IL-4)
釀酒酵母人糖磷脂酰肌Anti-XPO4 Antibody小鼠白介4(IL-4)
變灰尾孢菌人洲商陸Anti-XRCC2 Antibody小鼠白介6(IL-6)
雅氏艾耳球蟲人脂多糖/內Anti-XRCC6 Antibody小鼠白介6(IL-6)
彎曲芽胞桿菌人preptinAnti-XRCC6 Antibody小鼠白介9(IL-9)
球孢白僵菌人過氧化物體增殖物激活受體αAnti-YARS Antibody小鼠白介9(IL-9)
大腸埃希菌人載脂蛋白EAnti-XRN2 Antibody小鼠苗條受體(LR/Ob-R)
冬克青霉人成骨生長肽Anti-YEATS2 Antibody小鼠苗條受體(LR/Ob-R)
Sphingomonas oligoaromativorans人破骨分化因子Anti-YBOX2 Antibody小鼠瘦(LEP)
枯草芽孢桿菌人羥基膠原吡啶交聯Anti-YOD1 Antibody小鼠瘦(LEP)
黑木耳人脫氧膠原吡啶交聯Anti-YTHDF1 Antibody小鼠白血病抑制因子(LIF)
癌基因VAV2抗體皺褶革菌中國倉鼠肺細胞
囊泡相關膜蛋白相關的蛋白B黃斑紅菇人類成纖維細胞系
絲/蘇特定蛋白磷抗體褐黃鱗銹耳大鼠肝細胞
血管生長因子VG5Q抗體鉛色短孢牛肝菌小鼠X小鼠
CARM1抑制劑(CARM1-IN-1)蘇云金芽孢桿 鄰甲氧基肉桂酸
羊巴貝斯蟲(麻當株) 4-(2-吡啶偶氮)間苯二
黃色海假單胞 1-(2-吡啶偶氮)-2-萘
腹狀鐮刀 大果桉B雷帕霉
米曲霉 1-亞硝基-2-萘
黑曲霉 D-蟲熒光鈉
泡盛曲霉變種 克班寧
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 D-蟲熒光游離酸
瑞山海源 苦龍膽酯苷
枯草芽孢桿 石蕊
乳鏈球 甲紅鈉鹽
蠟狀芽孢桿 康普瑞磷酸二鈉
釀酒酵母 康普瑞
都柏林年輕泰坦桿洛桑亞種 甲紅
球孢白僵