詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:變構型Akt抑制劑(ARQ-092)
英文名稱:ARQ-092
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
ARQ-092是一種有效的選擇性和變構型Akt抑制劑,對Akt1,Akt2,Akt3的IC50分別為2.7nM,14nM和8.1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1313881-70-7 純度:98.07% 分子量:432.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
匍匐曲霉重組髓鞘少樹突膠質糖蛋白1-125Anti-GRTP1 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)
Rhodobacter vinaykumarii雙微體2癌基因抗原Anti-GRM8 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)
大腸埃希氏桿菌甲硝唑偶聯雞卵白蛋白Anti-GSDME Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)
污黑腐皮殼三聚與血藍蛋白偶聯物Anti-GSDMC Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)
假單胞菌三聚與牛血清白蛋白偶聯物Anti-GSK3B Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)
小麥紋枯與牛血清白蛋白偶聯物Anti-GSPT1 Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)
熒光威克酵母髓鞘少樹突膠質糖蛋白(活性多肽)Anti-GSTA1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)
釀酒酵母冰/與牛血清蛋白偶聯物Anti-GTF2A1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)
Shinella kummerowiae Lin et al.辣根過氧化物標記三聚Anti-GTF3C2 Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)
無色桿菌屬三聚偶聯雞卵白蛋白Anti-GTF3A Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)
產蝦青鞘鞍單胞菌三聚偶聯牛血清白蛋白Anti-GSTM2 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)
針猴頭三聚偶聯牛IgGAnti-GTF2H1 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)
庫爾勒海洋桿菌甲硝唑偶聯血藍蛋白Anti-GTPBP2 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
外外安德倫茨氏菌三聚與雞卵白蛋白偶聯物Anti-GTF3C3 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
巴西果小克銀漢霉神經元特異性烯化抗原Anti-GTF3C2 Antibody人抗紅抗體(RBC)
指狀青霉Nogo-66 (1-40)Anti-GTPBP2 Antibody人抗紅抗體(RBC)
鈉離子肌轉運蛋白抗體木霉紅色熒光蛋白標記人結直腸腺癌細胞
神經突觸相關蛋白SLITRK2抗體擬康氏木霉人肝內膽管癌細胞系
神經突觸相關蛋白SLITRK3抗體木木霉人大細胞肺癌細胞
神經突觸相關蛋白SLITRK4抗體雅致枝霉黑人Burkitt淋巴瘤細胞
變構型Akt抑制劑(ARQ-092)唾液乳桿水楊亞種 1,3,5-三溴苯
藤倉鐮孢 4-甲氧基偶氮苯
大隱球酵母 1,4-二甲氧基苯
蘇云金芽孢桿 2,2-二羥基聯苯
澳型核果褐腐病 暈苯
谷棒狀桿 4-溴聯苯
*肉葡萄球 4-溴苯
康寧木霉 溴化鈉
中國蜜環 鈉
黑曲霉 甘油磷酸鈣
哈氏弧 次亞磷酸鈣
纖維化纖維微細
樟疫霉 十八冠-6
解脂亞羅酵母 安息香乙
多形布勒擔子酵母 安息香
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)