詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:CK1δ/CK1抑制劑(SR-3029)
英文名稱:SR-3029
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
SR3029是一個強且有特異性CK1δ/CK1的抑制劑,IC50值是97nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1454585-06-8 純度:98.89% 分子量:480.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
幼角鐮孢 3-磷甘油脫氫Anti-GPRC5C Antibody人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)
釀酒酵母谷脫羧-65(抗原)Anti-GPRC5D Antibody人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)
綠色木霉糖原合激-3β(多肽)Anti-GPRASP1 Antibody人抗中性粒顆粒抗體(ANGA)
凸形假單胞菌核突觸蛋白-γ抗原Anti-GPRC5B Antibody人抗中性粒顆粒抗體(ANGA)
大豆慢生根瘤菌胰高血糖樣肽-1受體多肽Anti-GPRC5D Antibody人抗中性粒抗體(ANA)
亞尼亞鏈霉菌慶大霉偶聯牛血清白蛋白Anti-GPRIN1 Antibody人抗中性粒抗體(ANA)
芽孢桿菌屬重組-轉移Anti-GPRC6A Antibody人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
鞘單胞菌慶大霉偶聯雞卵白蛋白Anti-GPRC6A Antibody人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
皺褶假絲酵母人血清白蛋白Anti-GPRIN2 Antibody人抗胰島受體抗體(AIRA)
解淀粉芽胞桿菌人beta 亞基人絨毛膜促性腺激抗原Anti-GPS2 Antibody人抗胰島受體抗體(AIRA)
紅城紅球菌高遷移率族蛋白-1(抗原)Anti-GRASP Antibody人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)
釀酒酵母水蛭Anti-GPX3 Antibody人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)
金黃節桿菌人類狀瘤病16抗原Anti-GRAP Antibody人抗網硬蛋白抗體(ARA)
黑木耳鐵調節蛋白25Anti-GRASP Antibody人抗網硬蛋白抗體(ARA)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)4羥基壬烯偶聯牛血清白蛋白Anti-GRIK2 Antibody人抗網硬蛋白抗體(ARA)
康寧(氏)木霉干擾-γ多肽抗原(人)Anti-GRIA1 Antibody人抗網硬蛋白抗體(ARA)
醛固類還原家族7成員A2抗體蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種人牙齦上皮細胞
三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體蘇云金芽孢桿菌戈爾斯德變種小鼠肝枯否細胞
閱讀障礙相關蛋白Shootin抗體枯草芽孢桿菌深黑變種小鼠肉瘤瘤株
信號轉導分子SCDO3抗體塵埃芽孢桿菌人角膜上皮細胞
CK1δ/CK1抑制劑(SR-3029)球毛殼
白粑齒 溴化鋰
埃氏巨球形* 鈦鐵試劑
污水德沃斯氏 四氧化三鐵
圍小叢殼 鉑酸
葡萄座腔屬 紫脲酸
釀酒酵母 硬脂酸
灰樹花 3-苯酸
雙歧雙歧桿 肉豆蔻酸
Agrococcus terreus 肉豆蔻酸
雜色曲霉 衣康酸
小馬勃2-2 DL-4-羥基-3-甲氧基扁桃酸
味側耳 高香草酸
長枝木霉 反式-2-己烯酸
拜耳接合酵母 十七酸