詳細(xì)介紹
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
產(chǎn)品名稱:大鼠角膜成纖維原代細(xì)胞
英文名稱:Rat Corneal Fibroblast Cells
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:GOY-01X1075
分類:大鼠原代細(xì)胞
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 |
消化液 | 0.25% |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
大鼠角膜成纖維細(xì)胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠角膜成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠角膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備DMEM高糖,10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清。
1)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
2)凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2、細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類CD14+單核細(xì)胞,單一來源,預(yù)選型 10 million 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞 大鼠原代腎小管上皮細(xì)胞
Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3(W3)試劑盒 ,英文名: W3 ELISA Kit
Mouse leptin (LEP) ELISA Kit 小鼠瘦素(LEP)試劑盒
MousecomplemefactorH,CFHELISAKit 小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSPgp96ELISAKit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96
細(xì)胞NADH心肌黃酶活性染色試劑盒100次
ELISAKitIL-1大鼠白介素1
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T
大鼠角膜成纖維原代細(xì)胞小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒
HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChlamydiaachomatis,CT試劑盒人沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米TC1507品系試劑盒20次
HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標(biāo)簽) Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)
CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein
IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
1、收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。
5、建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和微生物菌種查詢網(wǎng)技術(shù)部溝通交流。
6、該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。