大鼠精原干原代細胞

培養信息：

包被條件

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 球形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠精原干細胞分離自睪丸組織；精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞，是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些優勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染，異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養。在哺乳動睪丸內，精子發生時一個受高度調控和持續的過程，精原干細胞（SSCs）一方面進行自我更新維持干細胞數量，另一方面又不斷執行分化成各級生精細胞直至后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發生的原始細胞，也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養體系的建立，在生物學、醫學、畜牧業生產及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群細胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠精原干細胞采用先機械吹打、后蛋白酶消化，結合Percoll密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠精原干細胞經CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

HO-8910細胞，卵巢癌細胞 人胃腺癌細胞,MCG803細胞 大耳山羊肺細胞;LDG-1  IL21R Others Human 人 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液   Caco-2細胞，結腸腺癌細胞 鼠激酶缺陷細胞株 小鼠角膜上皮細胞永生化細胞 人原代子宮內膜成纖維細胞

HtrA絲肽酶4(HTRA4)重組蛋白 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)

GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標簽)

IFNA4重組小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PVR Protein Rat 重組大鼠 CD155 / PVR / NECL5 蛋白

TMEM27重組人 TMEM27 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠胃泌素抑制肽(GIP)試劑盒 ，英文名： GIP ELISA Kit

Mouse aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒

Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSF-1(HumanHeatShockFactor1)ELISAKit人熱休克因子1

細胞NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)

ELISAKitIFN-γ大鼠γ干擾素

兔脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(rabbit A-FABP)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔血管緊張素II(rabbit Angiotensin-2)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

大鼠精原干原代細胞小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒

Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調素(CAM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規格：96T/48T

轉基因玉米NK603品系試劑盒20次

Humanserineprotease，PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規格：96T/48T

FCGR2B重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein

MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦II

IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein

CYGB Protein Human 重組人 Cytoglobin / CYGB 蛋白

AKT3 Protein Mouse 重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標簽)