JNK抑制劑(AS601245)公司正在出售的產(chǎn)品：RCC1/FITC 熒光標(biāo)記染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG
Rbms3 protein/FITC 熒光標(biāo)記Rbms3 protein抗體IgG
Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC 熒光標(biāo)記化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG
Reprimo/Rprm/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)內(nèi)的糖化蛋白抗體IgG
Resistin/FITC

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
茶樹菇Escherichia coli大鼠鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2(CAMK 2)

赤曲霉Escherichia coli大鼠肝脂(HL)

阿維菌鏈霉菌*Escherichia coli大鼠肝脂(HL)

庫氏野野村氏菌Escherichia coli大鼠煙堿型乙酰受體(N-AChR)

白迷孔菌Escherichia coli大鼠煙堿型乙酰受體(N-AChR)

光滑青霉Escherichia coli大鼠蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

孟氏假單胞菌Escherichia coli大鼠蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種Escherichia coli大鼠活化蛋白C(APC)

鴨疫里氏桿菌Escherichia coli大鼠活化蛋白C(APC)

冷海水黃桿菌Escherichia coli大鼠甘肽/甘(GAL)

金龜子綠僵菌Escherichia coli大鼠甘肽/甘(GAL)

球形賴芽孢桿菌Escherichia coli大鼠α葡萄糖苷(a-Glu)

海洋海源菌Escherichia coli大鼠α葡萄糖苷(a-Glu)

魯氏酵母Escherichia coli大鼠破骨分化因子(ODF)

克羅諾桿菌屬Escherichia coli大鼠破骨分化因子(ODF)

斯氏假單胞菌Escherichia coli大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)

胰脂肪相關(guān)蛋白1抗體青孢鏈霉菌人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞

妊娠相關(guān)血漿蛋白A抗體尖孢鏈霉菌SK-GT-2

磷化酪抗體絨蓋干酪菌G418抗性的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）

蛋白C抑制因子抗體綠蓋粉孢牛肝菌小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞
JNK抑制劑(AS601245)裂褶 OED60K型發(fā)酵工業(yè)通用消泡劑

大腸埃希 聚氧乙烯月桂

短波單胞 人參皂苷Rk1

蘇云金芽孢桿鲇澤亞種 曲通x-114

假黃色單胞 曲通x-100

枯草芽孢桿枯草亞種 吐溫85

潔小菇 人參皂苷Rg6

尖角凸臍蠕孢 吐溫80

E.coli C600 金色酰酯

葡萄座腔 林澤蘭內(nèi)酯D

核盤 吐溫65

雅致小克銀漢霉 林澤蘭內(nèi)酯C

彎孢 吐溫60

尖孢鐮刀古巴專化型 吐溫40

大腸埃希氏桿 林澤蘭內(nèi)酯B