大鼠腎動脈平滑肌原代細胞

培養信息：

包被條件

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠腎動脈平滑肌細胞分離自腎動脈組織；腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內，上行至皮質與髓質交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管，并向周圍的腎小體發出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網：腎小球毛細血管網，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細胞是腎動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠腎動脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠腎動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液   CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細胞裂解液   CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)  雜交瘤(B類) 兔原代支氣管上皮細胞 兔原代嗅鞘細胞

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原

CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標簽)

S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein

大鼠釋放激素受體抗體(GHR-Ab)試劑盒 ，英文名： GHR-Ab ELISA Kit

Porcine ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 豬轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒

ELISA 小鼠細胞凋亡相關基因(mouse BCL-2)  進口分裝

CLIAKitforLLO(HumanlisteriolysinO)ELISAKit人單核細胞增多性李斯特菌素O

通用型DNA氧化損傷AP位點比色法定量分析試劑盒20次

ELISAKitPAL雞L苯解氨酶

小鼠轉化生長因子-β1   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor -β1   規格：      英文縮寫：   TGF-β1

小鼠轉化生長因子-β2   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor -β2   規格：      英文縮寫：   TGF-β2

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-1   英文名稱：   Tissue inhibitors of metalloproteinases 1   規格：      英文縮寫：   TIMP-1

小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-2   英文名稱：   Tissue inhibitors of metalloproteinases 2   規格：      英文縮寫：   TIMP-2

大鼠腎動脈平滑肌原代細胞小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat oponin I (Tn- I) ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒

HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

DeerSerumamyloidA,SAA試劑盒血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞線粒體復合物II蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEndotheliallipase,ELELISAKit小鼠內皮脂肪酶(EL)試劑盒規格：96T/48T

BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein

Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)

APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)

DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。