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技術文章

丙酮酰四氫蝶呤合酶檢測試劑盒?操作步驟

閱讀:204          發布時間:2021-11-22

丙酮酰四氫蝶呤合酶檢測試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

抑制蛋白結構域蛋白1抗體

抑制蛋白結構域蛋白2抗體

抑制蛋白結構域蛋白3抗體

抑制蛋白結構域蛋白4抗體

雌二醇抗體

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體

轉錄激活蛋白crsp70抗體

卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體

錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體

載脂蛋白C3抗體

細胞凋亡增強核酸酶抗體

染色體脆弱性相關基因抗體

磷酸化蛋白激酶B抗體

銅轉運蛋白質β鏈抗體

酰基輔酶A合成酶家族4抗體

酸性磷酸酶樣蛋白2抗體

AHNAK核蛋白2抗體

二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

p53誘導蛋白5抗體

錨蛋白重復域5抗體

腦鈉通道蛋白2抗體

腦鈉通道蛋白4抗體

小腸鈉通道蛋白5抗體

APXL蛋白抗體

酸敏感離子通道蛋白3抗體

天門冬氨酸β羥化酶抗體

精氨酸加壓素受體2抗體

細胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體

膜粘連蛋白8抗體

水通道蛋白8抗體

錨蛋白重復結構域蛋白40抗體

凋亡抑制因子5抗體

水通道蛋白-3抗體


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