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有必要對血清進行熱滅活嗎?

閱讀:2193      發布時間:2020-6-22
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  血清的熱滅活是很多培養者感興趣的話題,價格不菲的血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質,而將它們置于50℃以上的溫度長達30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數實驗室之中血清的熱滅活還是作為常規來執行,多數實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響,下面我們就對胎牛血清的熱滅活進行一些探討和解釋。
  清熱滅活操作步驟:
  ①選用與血清瓶同規格的對照瓶一個。
  ②對照瓶內放入與血清等體積的水。
  ③溫度預試。對照瓶內插入2—3支經挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
  ④血清滅活。血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時,定時30分鐘。
  ⑤大瓶血清滅活后,進行分裝。
  ⑥保存。分裝后,抽樣做無菌試驗,-20~-70℃保存。
  多數細胞培養中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對于那些對血清進行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當條件;在滅活過程中,需要嚴格認真監測,并選擇一個可重復的方案進行操作。
  

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