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凋亡檢測試劑盒如何檢測細胞凋亡

閱讀:1800      發布時間:2019-7-23
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  在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側,這一變化早于細胞皺縮、染色質濃縮、DNA(脫氧核糖核酸)片斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現象。AnnexinV是一種磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將AnnexinV與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。
  細胞凋亡是一個形態學概念,對其形態的觀察是用凋亡檢測試劑盒研究凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態學變化是多階段的,起初,細胞間連接和微絨毛消失.細胞體積縮小,胞漿凝縮,內質網變疏松并與胞膜融合,形成一個個空抱,核搪體與線粒體等細胞器聚集,結構尚無明顯改變,細胞核內的染色質逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細胞核固縮呈勻一的致密物,進而斷裂成碎塊,此時細胞膜仍保持完整;然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細胞變成數個大小不等的有膜包裹的凋亡小體;后,凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細胞如巨噬細胞、上皮細胞等吞噬、消化。在凋亡發生的全過程中,細胞膜一直保持完整。同一組織中,不同細胞發生凋亡的進程并不同步。 

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