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核酸擴增技術(shù)（Nucleic acid amplification technique，簡稱NAT）的應(yīng)用正在逐漸取代基于培養(yǎng)的方法，成為細胞培養(yǎng)中檢測支原體污染的新選擇。德國MB公司生產(chǎn)的Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒就是應(yīng)用了NAT方法中的qPCR方法。

然而，不同的支原體NAT檢測方法之間，如檢測限和定量特性等，差異較大。為了協(xié)調(diào)支原體NAT檢測方法，生物參考材料的使用顯得尤為重要。為此，國際性可行性研究進行了多方參與的努力，涉及21個實驗室，采用26種定性、半定量或定量設(shè)計的NAT檢測方法，分析了四種遠緣相關(guān)的支原體物種（包括Acholeplasma laidlawii，Mycoplasma fermentans，M. orale，M. pneumoniae）的凍干制劑，并在不同濃度下進行了測試。

在一項研究中，發(fā)現(xiàn)使用M. fermentans制劑作為通用參考材料，可以有效降低試劑間的變異。于是，在進一步的可比性研究中，對該制劑進行了再生產(chǎn)和詳細的表征，并確認了其在不同NAT方法下的效價，以NAT可檢測單位（IU/ml）來表示。經(jīng)過世界衛(wèi)生組織（WHO）生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會（ECBS）的認證，該制劑被正式確定為“第一個世界衛(wèi)生組織國際標(biāo)準(zhǔn)，用于基于核酸擴增技術(shù)的通用支原體檢測"（WHO Tech Rep Ser 987:42, 2014），其效價為200,000 IU/ml。

相關(guān)研究發(fā)表在《Appl Environ Microbiol》上，文章標(biāo)題為：“World Health Organization International Standard To Harmonize Assays for Detection of Mycoplasma DNA"。

目前，這一世界衛(wèi)生組織國際標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)成為支原體NAT檢測方法的重要參考制劑。它不僅可用于評估NAT檢測方法的分析靈敏度，還可用于定量檢測方法的單位化校準(zhǔn)，并對支原體檢測領(lǐng)域的監(jiān)管要求進行規(guī)定。這標(biāo)志著支原體污染檢測在國際標(biāo)準(zhǔn)化方面取得了重要進展，將為該領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供更加統(tǒng)一和可靠的基準(zhǔn)，進一步促進細胞治療產(chǎn)品的安全和有效應(yīng)用。