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胎牛血清中的病毒檢查

閱讀:1777      發布時間:2017-10-25
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 胎牛血清是實驗室常用的天然培養基。它富含各種營養,但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細胞培養帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質檢中,也要進行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質。而胎牛血清的批號,則保證了每個批次的生產都是可以追溯的。
 

 

在美國,胎牛血清的病毒檢查遵循著9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53聯邦法令,并以獸藥委員會(CVMP)關于免疫性獸藥生產中應用牛血清的指南文件(EMEA/CVMP/743/00-Rev.2)、藥委員會(CPMP)關于生物藥生產中牛血清應用指南的文件(EMEA/CPMP/BWP/1793/02)為參考,并在美國藥典(USP)中有所描述。而我國在藥典中目前只有有關新生牛血清的質檢規定,還沒有胎牛血清的內容。
 

 

在USP提到病毒檢查中,建議使用兩種或兩種以上的細胞系作為檢測細胞,其中一種細胞系應為牛源。檢測時,添加15%的待測牛血清培養細胞至少21天,期間細胞至少傳代兩次。之后觀察是否存在病毒的擴增。

      如用顯微鏡觀察是否存在細胞病變效應(例如由牛鼻支氣管炎病毒導致)、細胞染色和鏡下包涵體檢查、血吸附檢查((牛副流感3型病毒),并在此基礎上進行針對如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查:

 

Ø牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)

Ø牛細小病毒

Ø牛腺病毒

Ø牛蘭舌病毒

Ø牛呼吸道合胞病毒

Ø呼腸弧病毒

Ø狂犬病病毒

 

在其他牛血清的應用中,可能還需要檢測一些其他的病毒。如:

 

牛赤羽病,牛皰疹病毒1(BHV-1)、副流感-3病毒(PI-3)、牛白血病、牛輪狀病毒、牛圓環病毒、牛多瘤病毒、冠狀病毒、牛環曲病毒、牛腸道病毒、牛星狀病毒、口蹄疫病毒(FMDV)、牛瘟病毒。
 

 

總之,確定牛血清沒有病毒感染,無論對于細胞培養,還是疫苗生產,都具有非常重要的意義。

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