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進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL

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產(chǎn)品型號

品       牌Wako/和光純藥

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2025-04-30 15:01:12瀏覽次數(shù):638次

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進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL采用雙抗體夾心法測定人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)水平。用純化的人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)抗體包被微孔板,制成固相載體,實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入HRP標(biāo)記的ABP抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL原理:

采用雙抗體夾心法測定人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)水平。用純化的人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)抗體包被微孔板,制成固相載體,實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入HRP標(biāo)記的ABP抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算測試樣品中ABP濃度。 

實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:

儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。

緩沖液使用:加5ul的緩沖液于50ul的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。

混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。

洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。

樣品收集、處理及保存:

細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。

血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。

血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上
清。

體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000rmp離心20分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。

樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


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