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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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貨號 | YS-02X9699 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
規格:1×10?cells/T25培養瓶
貨號:YS-02X9699
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
Polycystin 1/FITC 熒光素標記多囊腎蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Goat Chicken Whole serum 羊抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規格: 1ml
細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 IASPP 0.1ml
Rabbit human IgG 兔抗人IgG 1mg
fowl typhoid and pullorum disease 英文名稱: 雞白痢、雞傷寒抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Raptor (Ser792) 磷酸化mTOR相關調控蛋白抗體 規格 0.1ml
Goat Chicken Whole serum 羊抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規格: 1ml
DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX9 配對盒基因9抗體 規格 0.1ml
CD8A Kit Mouse 小鼠 CD8a ELISA配對抗體 ELISA
TNFSF9 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員9抗體 0.1ml
c-Myc tag 英文名稱: c-Myc tag標簽抗體 0.1ml
CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
SFR19 英文名稱: 剪接因子,精酸/絲酸豐富19 0.2ml
FGF20 英文名稱: 成纖維細胞生長因子20抗體 0.1ml
黃體釋放抗體/促性腺釋放抗體 LHRH/GNRH 0.1ml
RASGRF1/FITC 熒光素標記Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體 規格 0.1ml
Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神經保護肽Multi-class antibodies規格: 0.5mg
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7二氫睪酮,雄諾龍翅子羅漢果I植物氨含量光譜法定量檢測試劑盒
多拉菌素川陳皮素/酵母氨含量光譜法定量檢測試劑盒
3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸,塞羅寧川芎氨含量光譜法定量檢測試劑盒
Corylifol A(標準品)穿心蓮內酯,穿心蓮乙素 氨待測樣品處理試劑盒
溴芬酸鈉穿心蓮乙素酒類氨熒光定量檢測試劑盒
溴芬酸鈉(標準品)次百部堿 飲料氨熒光定量檢測試劑盒
鹽酸氟哌噻噸五加苷B食物氨熒光定量檢測試劑盒
茶多酚;綠茶提取物五加苷D 飼料氨熒光定量檢測試劑盒
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
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