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外生骨疣蛋白1(EXT1)重組蛋白

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品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 09:56:30瀏覽次數:315次

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供貨周期 現貨 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Exostoses 1 (EXT1)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
外生骨疣蛋白1(EXT1)重組蛋白公司正在出售的產品:副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒副結核桿菌PCR檢測試劑盒副流感病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒副流感病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒副溶血嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒睡眠嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

公司產品僅供科研實驗產品屬性:

產品名稱:外生骨疣蛋白1(EXT1)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Exostoses 1 (EXT1)

EXT; Ttv; LGCR, LGS; Langer-Giedion Syndrome Chromosome Region; Glucuronosyl-N-acetylglucosaminyl-Proteoglycan 4-Alpha-N-Acetylglucosaminyltransferase

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::分泌

預測分子量:25.9kDa

實際分子量:27kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Cys334~Arg549 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:9.3

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

特點:

標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。

酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。

熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經恰當的激光可發光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

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圖片6.png


標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。

不同的系統步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,條件優化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

CYP1A1產品名稱: 細胞色suP450 1A1單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse

FAM40A產品名稱: FAM家族蛋白40A抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

MLT5產品名稱: 睪丸特異性MLT5蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit

TSPAN4產品名稱: 四分子交聯體4/四旋蛋白4/四次跨膜蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep

TPPP產品名稱: 微管蛋白聚合促進蛋白24交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

AT2R2產品名稱: 緊張suⅡ受體2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep

C1orf187/Draxin產品名稱: 1號染色體開放閱讀框187抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Sheep

ERRFI1產品名稱: 促分裂原誘導基因6蛋白/Mig-6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep

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操作步驟

根據使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現用現加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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