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葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白大鼠

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2025-07-20 12:08:38瀏覽次數:215次

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供貨周期 現貨 規格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D464 應用領域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant?Glucuronidase?Beta?(GUSb)
物種 Rattus?norvegicus?(Rat,大鼠)
葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白大鼠公司正在出售的產品:人基質金屬8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒96T 93.75-6000 pg/mL人基質金屬1(MMP-1)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL硝基(Nitrotyrosine)ELISA試劑盒96T 15.6-1000 pg/mL

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產品屬性:

產品名稱

物種

貨號

葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D464

英文名稱:Recombinant Glucuronidase Beta (GUSb)

GUS-B; MPS7; Beta-G1

型號:GOY-01D464

信號轉導

酶與激酶

代謝通路

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU per 1μg (determined by the LAL method).

亞細胞定位::溶酶體

預測分子量:28.2kDa

實際分子量:27kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Val440~Phe648 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:8.4

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達及純化:

1.培養500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;

2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

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