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產(chǎn)品名稱：脂肪酸合成酶（FAS）微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6366
分類：輔酶Ⅱ系列
商品介紹：
細胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多，而氧化分解降低，會導(dǎo)致細胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰和丙二酰而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

測定原理

以NADPH為還原力，FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸；通過測定NADPH的減少量，即可推算出FAS活性。

實驗中所需儀器和用品

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

圖

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL  dCTP 溶液，2.5mM2mL

Zinquin 乙酯5mg  dCTP 溶液，100mM0.5mL

1400W(iNOS 抑制劑 )2mg  DB3.1 感受態(tài)細胞10×100μL

5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL  dATP 溶液，2.5mM2mL

Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL  dATP 溶液，100mM0.5mL

Cycloheximide50mg  CFDA SE ( 細胞增殖示蹤熒光探針 )5mg

Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒50 次

Decitabine 地西他濱5mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒10 次

Doxorubicin(Adriamycin) 100μL  cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次

Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL  Catechin hydrate( 抗氧化劑 )0.5g
大鼠γ-半合成酶(γ-GCS)elisa檢測試劑盒

大鼠δ氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)elisa分析檢測試劑盒

大鼠δ氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)elisa檢測試劑盒

大鼠δ樣蛋白4(δLL4)elisa檢測試劑盒

大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒
脂肪酸合成酶（FAS）微量法測試盒植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次  大提柱式血液 DNAout4次

植物種屬鑒定 PCR Mix 9100 次  大提柱式細菌 RNAout5次

植物種屬鑒定 PCR Mix 10100 次  大提柱式細菌 DNAout4次

植物種屬鑒定 PCR Mix 11100 次  大提柱式細菌 DNAout( 含 )4次

轉(zhuǎn) ESPES 基因植物 PCR Mix100 次  大提柱式土壤 DNAout4次
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。