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根據干細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。
培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。
實驗步驟:
1. 貼壁細胞的消化法傳代:
(1)吸除或倒掉瓶內舊培養液。
(2)D-Hanks液洗2~3次。
(3)向瓶內加入適量消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使消化液流遍所有細胞表面。
(4)然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液,輕輕搖動再倒掉大部分消化液,僅留少許進行消化(也可不采用上述步驟直接加消化液進行消化)。
注意事項:
1. 胰蛋白酶要預溫,溫度37℃左右為宜℃。
2. 離心轉速要合適,轉速過低,不能有效分離細胞,離心速度過大,時間過長,會擠壓細胞造成損傷甚至死亡。
3. 要定時觀察干細胞,發現污染,應及時處理。
2183-17-7 1-萘磷酸鈉鹽 英文名稱: CAS號: ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DISODIUM SALT
81012-89-7 1-萘磷酸鈉鹽(+4°C) 英文名稱: CAS號: 1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE
67000-89-9 1-芘丁醇 99% 英文名稱: CAS號: 1-PYRENEBUTANOL
3443-45-6 1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 英文名稱: CAS號: 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid
19694-02-1 1-芘甲酸 97% 英文名稱: CAS號: 1-PYRENECARBOXYLIC ACID
711-79-5 1-羥基-2-乙酰萘 英文名稱: CAS號: 1'-HYDROXY-2'-ACETONAPHTHONE
39968-33-7 1-羥基-7-氮雜苯并三氮唑 (HOAt)(2-8℃) 英文名稱: CAS號: 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole
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