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青島普瑞邦生物工程有限公司

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用

時間:2024/5/17閱讀:397

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用

針對豆豉、腐乳基質(zhì)可能存在難凈化、雜質(zhì)多的特點,普瑞邦技術工程師根據(jù)《GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素BG族的測定》中半流體樣品實驗方法及參考文獻,進行了免疫親和柱與多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化對比驗證實驗,具體實驗過程如下:

【標準品】黃曲霉毒素混合標準工作液:1ug/mL

【樣品處理】

樣品

豆豉(a)腐乳(b

編號

a1b1

a2b2)

a3b3)

a4(b4)

處理過程

20mL70%甲醇水

20mL84%乙腈水

超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩 20min

超速離心10min,上清液備用

取提取液4mLM160固相凈化柱

/

取提取液4mLM160固相凈化柱

/

2mL過柱后液體加18mL水稀釋

取提取液2mL18mL水稀釋

2mL過柱后液體加18mL水稀釋

取提取液2mL18mL水稀釋

全部過普瑞邦免疫親和柱,最終2mL甲醇定容上機

加標水平

5mg/L

 

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



液相譜圖如下:

b1:腐乳70%甲醇提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



b2:腐乳70%甲醇提取只過免疫親和柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



b3:腐乳84%乙腈提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用


 

b4:腐乳84%乙腈提取只過免疫親和柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用


 

a1:豆豉70%甲醇提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用


 

a2:豆豉70%甲醇提取只過免疫親和柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



a3:豆豉84%乙腈提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



a4:豆豉84%乙腈提取只過免疫親和柱凈化

柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測的應用



【實驗結果】


通過實驗驗證,按照以上前處理流程,84%乙腈或70%甲醇提取后,過免疫親和柱就能達到凈化效果,但是70%甲醇提取腐乳、豆豉兩種基質(zhì)回收率偏低,建議實驗過程為84%乙腈提取后過免疫親和柱凈化。

【液相條件】
流動相:甲醇:水 = 45:55
色譜柱:Pribolab真菌毒素檢測專用柱(C18250×4.6 mm5 μm
流速:1.0 mL/min
進樣量:10 μL
光化學柱后衍生器:Pribolab® KRC
激發(fā)波長:360 nm,發(fā)射波長:440 nm




 

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