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內素概念
內素,是革蘭氏陰性細胞壁中的一種成分,叫做脂多糖。脂多糖對宿主是有性的。內素只有當死亡溶解或用人工方法菌細胞后才釋放出來,所以叫做內素。
其性成分主要為類脂質A。內素位于細胞壁的較外層、覆蓋于細胞壁的黏肽上。的內素的性作用較弱,大致相同,可引起發熱、微循環障礙、內素休克及播散性內凝血等。內素可以用鱟試劑檢測。
內素的
被污染的產品內素即使在生產中采取了的工藝和嚴格的預防措施,原液仍有可能被污染,如何處理已被污染的原液是比較棘手的問題。因為原液中通常已加入保護劑,重新純化是困難的。如果原液及保護劑的分子量與內素分子量差別較大,那么選用適當的的濾膜,通過濾來內素是可能的,但由于膜吸附過程中產熱及系統殘留等原因,活性損失較大。
生物制品在生產過程中內素也是純化環節中重要一環節。生物制品的純化,主要是采用柱層析,如疏水層析、離子交換、親和層析、分子篩等,這些純化目標產品的同時也可以內素。
三、層析介質內素原理和情況
1.分子篩:分子篩是利用凝膠的網狀結構根據分子大小進行分離的一種方法。一般重組產品分子量為幾萬道爾頓,而內素分子量為幾十萬至上百萬道爾頓,常是多聚體,因此利用分子篩可以內素,但其處理量小,處理時間較長。
2.疏水層析:內素的脂肪A部份有很強的疏水性,但在高鹽下會凝集,無法掛上疏水層析柱。可選擇能結合目標蛋白的疏水介質而內素。
3.離子交換:離子交換法是通過帶電的溶質分子與離子交換劑中可交換的離子進行交換而分離純化的方法。內素在pH>2時帶負電荷,與陰離子交換介質Q Bio-sep FF或DEAE Bio-sep FF有較強結合,可在洗脫目標蛋白后用高鹽緩沖液或NaOH,這是離子交換法內素的基礎。Pharmacia公司已研究利用離子交換層析法從白蛋白中內素的工藝,主要采用DEAE Sepharose Fast Flow介質,將被內素污染的白蛋白上柱,白蛋白和大部分內素結合于介質上,先清洗掉不結合的內素,然后選擇性洗脫白蛋白。
4.親合層析:親合層析,是吸附劑在生產中的運用使得生物大分子的純化變得簡單。吸附的原理基于抗原、抗體的性作用,以目標蛋白作為抗原,將通過雜交瘤生產的單克隆抗體偶聯于介質上,以此介質來吸附目標蛋白。由于相互作用的高度性,理論上有目標蛋白吸附于介質上,內素穿透,洗脫后將得到純度很高的無熱原產品。實際上,由于介質本身存在的非性吸附,仍有少量的雜蛋白和內素同時被吸附,但內素含量是的。在干擾素(IFN)生產中,洗脫物內素含量一般為0.25EUmL-1。
目前較為的處理方法是采用親和層析將素底物LAL或多粘菌素B(PMB)偶聯于CNBr activated Bio-sep FF或NHS-activated Bio-sep FF上,以此介質性吸附內素,而讓蛋白通過。
產品供應:
離子交換層析介質 | DEAE-瓊脂糖凝膠 FF | |
Q-瓊脂糖凝膠 FF | ||
CM-瓊脂糖凝膠 FF | ||
SP-瓊脂糖凝膠 FF | ||
DEAE-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
Q-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
CM-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
生化分離介質 | SP-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | |
疏水作用層析介質 | 苯基-瓊脂糖凝膠 FF | |
丁基-瓊脂糖凝膠 FF | ||
辛基-瓊脂糖凝膠 FF | ||
苯基-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
丁基-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
辛基-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
親和層析介質 | Ni-瓊脂糖凝膠 FF | |
谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 FF | ||
辛巴藍-瓊脂糖凝膠 FF | ||
肝素-瓊脂糖凝膠 FF | ||
蛋白A-瓊脂糖凝膠 FF | ||
刀豆蛋白A-瓊脂糖凝膠 FF | ||
小麥凝集素-瓊脂糖凝膠 FF | ||
巰基乙醇-瓊脂糖凝膠 FF | ||
IgG-瓊脂糖凝膠 FF | ||
賴氨酸-瓊脂糖凝膠 FF | ||
組氨酸-瓊脂糖凝膠 FF | ||
DNA-瓊脂糖凝膠 FF | ||
去內素瓊脂糖凝膠 FF | ||
Ni-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
谷胱甘肽-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
辛巴藍-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
肝素-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
蛋白A-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
刀豆蛋白A-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
小麥凝集素-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
巰基乙醇-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
IgG-陶瓷瓊脂糖凝膠 | ||
賴氨酸-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
組氨酸-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
DNA-陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
去內素陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
凝膠層析介質 | 葡聚糖凝膠 G15 | |
葡聚糖凝膠 G25 | ||
葡聚糖凝膠 G50 | ||
葡聚糖凝膠 G75 | ||
葡聚糖凝膠 G100 | ||
葡聚糖凝膠 G150 | ||
葡聚糖凝膠 G200 | ||
活化中間體 | NHS 活化瓊脂糖凝膠 | |
CNBr 活化瓊脂糖凝膠 | ||
環氧活化瓊脂糖凝膠 | ||
NHS 活化陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
CNBr 活化陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
環氧活化陶瓷/瓊脂糖凝膠 | ||
大孔吸附劑 | SD 200 芳香族大孔吸附劑 | |
SD 300 芳香族大孔吸附劑 | ||
SD 600 芳香族大孔吸附劑 | ||
ZG DM 11 非極性大孔吸附劑 | ||
ZG DM 130 弱極性大孔吸附劑 | ||
ZG DM 180 極性大孔吸附劑 | ||
ZG CAD 45 弱極性大孔吸附劑 |
上述產品齊岳生物均可供應,用于科研!
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