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高效液相色譜儀的相關應用講述

閱讀:1456      發布時間:2023-8-28
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高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。
儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣本濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式輸出檢測結果。
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上**相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。 

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